[發明專利]用于靶向遞送siRNA的組合物

在審

• 申請號: 201180010758.8
• 申請日: 2011-02-18
• 公開（公告）號: CN102869774A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: P·海德威格;T·霍夫曼;E·A·基塔斯;D·L·劉易斯;P·莫爾;D·B·羅澤瑪;W·瑟爾;L·C·瓦利斯;D·H·維基菲爾德
• 申請（專利權）人: 箭頭研究公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K31/713;A61K47/18;A61K48/00;C12N15/87
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.一種用于體內遞送寡核苷酸到肝臟細胞的組合物，所述組合物包括：

a)共價連接于至少具有20個碳原子的疏水基團的寡核苷酸；和

b)可逆掩蔽和靶向的兩親性聚合物，所述聚合物包括從含胺單體、含低疏水性基團單體和含高疏水性基團單體合成的三元共聚物，其中多種半乳糖衍生物和PEG基團通過pH不穩定的雙取代馬來酸鍵與所述聚合物單獨連接，且其中所述pH不穩定的雙取代馬來酸鍵的切割產生胺基，從而生成膜活化多胺。

2.一種用于體內遞送寡核苷酸到肝臟細胞的組合物，所述組合物包括：

a)共價連接于半乳糖三聚體的寡核苷酸；和

b)可逆掩蔽和靶向的兩親性聚合物，所述聚合物包括從含胺單體、含低疏水性基團單體和含高疏水性基團單體合成的三元共聚物，其中多種半乳糖衍生物和PEG基團通過pH不穩定的雙取代馬來酸鍵與所述聚合物單獨連接，且其中所述pH不穩定的雙取代馬來酸鍵的切割產生胺基，從而生成膜活化多胺。

3.用于體內遞送RNA干擾多核苷酸到肝臟細胞的偶聯遞送系統，所述系統包括：

其中,

P是膜活化多胺

L²是pH不穩定連接，

M¹是含半乳糖衍生物的電荷中性掩蔽劑，

M²是含聚乙二醇的電荷中性掩蔽劑，

y和z是大于1的整數，其中y和z的值之和大于P上胺的50％，

N是RNA干擾多核苷酸,

A是半乳糖三聚體或具有至少20個碳原子的疏水基團，

P的正電荷被中和且通過生理pH不穩定連接L²結合M¹和M²來修飾50%以上的P胺而可逆抑制P的膜活性，和

響應pH降低的L²切割恢復P的胺和膜活性。

4.一種生產RNA寡核苷酸遞送組合物的方法，所述方法包括：

a)形成膜活化多胺；

b)形成包括含半乳糖衍生物的電荷中性雙取代馬來酸酐的第一掩蔽劑；

c)形成包括含聚乙二醇的電荷中性雙取代馬來酸酐的第二掩蔽劑；

d)可逆抑制膜活化多胺的膜活性，其中所述抑制由修飾所述多胺上50%或更多的胺組成，所述修飾通過將所述多胺與所述第一和第二掩蔽劑反應，從而使多種半乳糖衍生物和多種聚乙二醇通過生理pH不穩定的雙取代馬來酸連接膜活性多胺而實現，和

e)連接RNA干擾多核苷酸與半乳糖三聚體或具有至少20個碳原子的疏水基團;

f)在適合體內給予的溶液中提供所述RNA干擾多核苷酸和可逆抑制的膜活化多胺。

5.如權利要求1-4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述RNA干擾多核苷酸選自下組：DNA、RNA、dsRNA、RNA干擾多核苷酸、siRNA、和miRNA。

6.如權利要求1-4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述肝臟細胞由肝細胞組成。

7.如權利要求3或4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述膜活化聚合物含兩種或更多不同單體。

8.如權利要求7所述的組合物，其特征在于，所述膜活化聚合物由含胺單體、低疏水性基團單體和高疏水性基團單體組成。

9.如權利要求1-4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述可逆掩蔽的膜活化多胺溶于水。

10.如權利要求1-4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述膜活化多胺是隨機共聚物。

11.如權利要求10所述的組合物，其特征在于，所述隨機共聚物選自聚乙烯醚和聚丙烯酸酯。

12.如權利要求1、2或8中任一項所述的組合物，其特征在于，所述含胺單體、低烷基單體和高烷基單體以4-8個含胺單體：3-5個低疏水性基團單體：1個高疏水性基團單體的比例存在。

13.如權利要求12所述的組合物，其特征在于，所述低疏水性基團由丁基組成且所述高疏水性基團由十八烷基或十二烷基組成。

14.如權利要求1-4中任一項所述的組合物，其特征在于，所述掩蔽劑可逆連接所述多胺上至少70%的胺。