[發(fā)明專(zhuān)利]一種酸性耐熱異淀粉酶基因工程菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110459137.X
• 申請(qǐng)日: 2011-12-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102559568A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳敬;陳晟;段緒果;陳堅(jiān)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/21
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/21;C12N15/56;C12N15/63;C12P19/18;C12P19/16;C12R1/19
• 代理公司: 北京匯信合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種酸性耐熱異淀粉酶基因工程菌，其特征在于，該基因工程菌是以攜帶重組質(zhì)粒表達(dá)耐熱異淀粉酶基因的大腸桿菌E.coli?BL21(DE3)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因工程菌，其特征在于所述重組質(zhì)粒為pUC系列，pET系列，pT7-7，或pGEX中的任意一種。

3.構(gòu)建權(quán)利要求1或2所述基因工程菌的方法，其特征在于克隆Tfu_1891編碼基因，Genbank登錄號(hào)NC_007333.1到pT7-7載體，以E.coli?BL21(DE3)為表達(dá)宿主，實(shí)現(xiàn)了酸性耐熱異淀粉酶的高效表達(dá)。

4.權(quán)利要求1所述基因工程菌應(yīng)用于α-環(huán)糊精的生產(chǎn)，其特征在于按照5-20％的濃度進(jìn)行淀粉調(diào)漿，在50-90℃條件下保溫5-15分鐘；調(diào)節(jié)溫度30℃-60℃，調(diào)pH5.0-6.0后，按照每克淀粉加入2-100U的異淀粉酶和10-100個(gè)單位的α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶，加入5％體積的有機(jī)溶劑后，充分反應(yīng)4-10小時(shí)；回收有機(jī)溶劑，采用結(jié)晶方法得到α-環(huán)糊精。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述異淀粉酶是與α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶同步添加，二種酶同時(shí)作用于淀粉達(dá)到脫支、環(huán)化同步進(jìn)行。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的異淀粉酶可以先添加先對(duì)淀粉進(jìn)行部分脫支，再添加α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求4-6任一所述的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為乙醇，異丙醇，正丁醇，正癸醇中任一種。