[發明專利]一種提取高純度微囊藻毒素的方法無效
| 申請號: | 201110455131.5 | 申請日: | 2011-12-30 |
| 公開(公告)號: | CN102516367A | 公開(公告)日: | 2012-06-27 |
| 發明(設計)人: | 母銳敏;袁學良;石敬華;韓雪梅 | 申請(專利權)人: | 山東建筑大學 |
| 主分類號: | C07K7/56 | 分類號: | C07K7/56;C07K1/14 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 王立曉 |
| 地址: | 250101 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提取 純度 微囊藻 毒素 方法 | ||
1.一種提取高純度微囊藻毒素的方法,其特征是,包括步驟如下:
(1)水樣預處理:將銅綠微囊藻水樣經液氮反復凍融2-4次,以破碎藻細胞,釋放胞內微囊藻毒素MC-LR,然后將凍融后的水樣離心取上清液備用;
(2)SPE固相萃取柱的預處理、MC-LR的富集與純化:用甲醇清洗固相萃取柱2-4次,再用超純水清洗2-4次;向清洗后的固相萃取柱內通入步驟(1)的上清液過柱,過柱完后用甲醇水溶液作淋洗液清洗富集了MC-LR的固相萃取柱,除去雜質;
(3)MC-LR的溶出與濃縮:用100%甲醇作為洗脫液清洗富集了MC-LR的固相萃取柱以洗脫MC-LR,使MC-LR溶出,將溶出的MC-LR-甲醇混合溶液置于旋轉蒸發儀,40-60℃,旋轉蒸發10-20min。
2.根據權利要求1所述的一種提取高純度微囊藻毒素的方法,其特征是,步驟(1)中所述的離心是在8000-10000rpm速度下離心8-12分鐘。
3.根據權利要求1所述的一種提取高純度微囊藻毒素的方法,其特征是,步驟(2)中所述的固相萃取柱為C18固相萃取柱;所述的過柱速度均為5ml/min。
4.根據權利要求1所述的一種提取高純度微囊藻毒素的方法,其特征是,步驟(2)中所述的甲醇水溶液濃度為10%-20%,洗滌1-2次。
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