[發(fā)明專利]一種含或不含β-羥基-γ-氨基酸修飾的發(fā)夾聚酰胺、制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110454689.1
• 申請(qǐng)日: 2011-12-30
• 公開（公告）號(hào): CN102558158A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張文;吳艷玲;江世坤;陳興來
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D403/14
• 分類號(hào): C07D403/14;A61K31/4178;A61K47/22;A61K48/00;C12Q1/68
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所 33213
• 代理人: 吳秉中

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明屬于化工醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含或不含β-羥基-γ-氨基酸修飾的發(fā)夾聚酰胺、制備方法及應(yīng)用。?

背景技術(shù)

寡肽作為生物治療及基因調(diào)控藥物是長(zhǎng)期以來世界范圍內(nèi)重點(diǎn)研發(fā)的藥物之一。本發(fā)明涉及的是手工固相合成的包含芳香五元環(huán)結(jié)構(gòu)單元的聚酰胺以及它們?cè)贐-DNA小溝中對(duì)堿基序列識(shí)別的應(yīng)用。?

作為本發(fā)明的目的化合物聚酰胺(Polyamide)，它能在B-DNA小溝特異性的識(shí)別堿基，具有較高的結(jié)合力，且有良好的細(xì)胞膜的滲透性，這種聚酰胺分子具有穿透細(xì)胞膜識(shí)別基因序列、調(diào)控基因表達(dá)的能力，是目前最有潛力開發(fā)成基因靶向藥物的合成小分子之一。但如何獲得足夠量的聚酰胺化合物以滿足其研究及生物試驗(yàn)的需求是聚酰胺研究所面臨的問題。現(xiàn)在,?獲得這類化合物主要來自二種方法：1.?固相合成法；?2.?液相合成法。?二種方法一般都是從碳端開始，一個(gè)單體(monomer)再接另一個(gè)單體直至合成最終聚酰胺化合物(簡(jiǎn)稱‘1+1合成’)。二種合成法存在以下缺點(diǎn)：（a）一次循環(huán)合成的量一般在0-100mg左右，?只能滿足一般研究的需要,?不能滿足動(dòng)物試驗(yàn)以及藥物篩選的需要；（b）目前，對(duì)其基本的合成規(guī)律理解不夠或由于這類化合物本身結(jié)構(gòu)的特殊性，利用‘1+1合成’，每一步的合成產(chǎn)率有時(shí)相差很大,?有時(shí)由于中間的某步不能完成,?導(dǎo)致整個(gè)化合物的合成失敗。這樣,?既浪費(fèi)了時(shí)間,?又增加了研究成本；（c）目前商品化的構(gòu)成聚酰胺的四個(gè)單體合成成本較高，市場(chǎng)價(jià)格較貴，并且，有一定的環(huán)境污染，導(dǎo)致利用‘1+1合成’方法制備的聚酰胺成本較高；必須對(duì)單體的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，降低生產(chǎn)成本，減少污染，才能使‘1+1合成’技術(shù)得到更廣泛的應(yīng)用；（d）更重要的是：液相合成方法給環(huán)境帶來了巨大的污染。本專利發(fā)明主要應(yīng)用二聚體為原料手工固相合成目的聚酰胺的技術(shù)方法。?

????以基因?yàn)榘袠?biāo)的藥物治療是將來治療基因相關(guān)疾病的重要研究發(fā)展方向,?比如:?遺傳病基因治療、癌基因治療及以艾滋病為代表的重要感染性疾病的治療。所以,?以基因?yàn)榘袠?biāo)的治療藥物的研究和開發(fā)正吸引著世界各國(guó)化學(xué)生物學(xué)家、醫(yī)藥學(xué)家和實(shí)業(yè)家。由吡咯和咪唑組成的聚酰胺(吡咯-咪唑聚酰胺,?Polyamide)是一類能在DNA小溝1：1特異性識(shí)別堿基的合成小分子化合物?；并且，具有良好的細(xì)胞滲透性、能進(jìn)入核中，不易被核酸酶水解，相對(duì)轉(zhuǎn)錄因子能較強(qiáng)的鍵合特定靶基因。充分的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明:?它能通過在啟動(dòng)子區(qū)和增強(qiáng)子上干涉轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)，達(dá)到調(diào)控與疾病相關(guān)突變基因的表達(dá)，而對(duì)正常細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)條件下沒有損傷。因而,?此類化合物具有重要的研究?jī)r(jià)值，是目前小分子基因靶向藥物的研究熱點(diǎn)之一。這類化合物一般由2-3個(gè)不同的芳香雜環(huán)組成,?經(jīng)常用到的是：?Ｎ-甲基吡咯(P?y)?和N-甲基咪唑(I?m)。?在DNA小溝中,?二個(gè)芳香氨基酸反平行、邊靠邊與預(yù)先確定的DNA堿基序列緊密地鍵合。Ｎ-甲基吡咯殘基(P?y)傾向于識(shí)別T,?A和C堿基；N-甲基咪唑殘基(I?m)?是G堿基的讀取元素；而3-羥基-Ｎ-甲基吡咯殘基(Hp)能特異地識(shí)別T。到目前為止,人們能夠用I?m/P?y配對(duì)識(shí)別G·C堿基對(duì)；反之，一個(gè)P?y/I??m配對(duì)能與C·G鍵合；?P?y/P?y配對(duì)能把T·A、A·T與G·C、C·G區(qū)分開，但不能把T·A與A·T區(qū)分開；然而，Hp/P?y配對(duì)能把T·A從A·T、G·C和C·G區(qū)分開。但是，由于用Hp作為T堿基的識(shí)別元素尚存在一些缺點(diǎn)：(1)Hp在酸或自由基存在條件下，長(zhǎng)時(shí)間容易降解。(2)相對(duì)于P?y，H_P的親和力更低。(3)在N-末端的Hp對(duì)任何的堿基幾乎都沒有特異性。所以，尋找T堿基的最佳識(shí)別元素是研究聚酰胺中要解決的另一重要問題。?

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種一種含或不含β-羥基-γ-氨基酸修飾的發(fā)夾聚酰胺、制備方法及在基因堿基對(duì)識(shí)別中的應(yīng)用。?

所述的一種含或不含β-羥基-γ-氨基酸修飾的發(fā)夾聚酰胺，其特征在于結(jié)構(gòu)通式如式（Ⅰ）所示：?