[發明專利]梅花遺傳圖譜構建方法

無效

• 申請號: 201110454348.4
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN103184277A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 張啟翔;孫麗丹;徐宗大;張杰;陳晶鑫
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.一種梅花遺傳圖譜構建方法，其包括如下步驟：

1)構建梅花F₁代擬測交群體；

2)提取父母本及其子代基因組DNA；

3)利用限制性內切位點相關的DNA測序方法對父母本及其子代基因組進行重測序，獲得符合孟德爾遺傳規律的單核苷酸多態性標記；

4)根據所獲得的單核苷酸多態性標記，應用擬測交策略構建梅花遺傳圖譜。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，根據作圖親本選配原則，選擇結實率高，子房飽滿的梅花品種為母本，選擇花藥飽滿，散粉量大，花粉生活力高的梅花品種為父本，在保留母本花萼的情況下，用鑷子去雄，采取一次授粉的方法，進行人工雜交選育，用收獲的子代構建F₁代擬測交群體。

3.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，其中父本花藥在溫度20～25℃，濕度10～40％下，散粉15～20小時，收集花粉。

4.根據權利要求2或3所述的構建方法，其特征在于，以‘粉瓣’為母本，以‘扣子玉蝶’為父本進行雜交，構建F₁代擬測交群體。

5.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，利用限制性內切酶對父母本及其子代基因組DNA進行酶切，利用Solexa方法對純化的父母本及其子代的酶切片段進行單末端測序，使用SOAPsnp軟件獲得符合孟德爾遺傳規律的單核苷酸多態性標記。

6.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，利用卡平方檢驗作圖群體是否符合孟德爾期望分離比為1∶2∶1或1∶1的標記，P＜0.01，過濾掉SNP分子標記中偏分離的標記，利用JoinMap3.0的軟件，設置LOD值≥3，構建梅花高密度遺傳圖譜。