[發明專利]一種檢測抗β2糖蛋白Ⅰ抗體的試劑裝置及其方法

有效

• 申請號: 201110454005.8
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN103185801A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 胡德明;劉清波;何林;陽輝
• 申請（專利權）人: 深圳市亞輝龍生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N21/31
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 胡堅

技術領域

本發明申請涉及一種檢測抗β2糖蛋白I抗體的試劑裝置及其方法，屬于臨床免疫學檢測技術領域。

背景技術

抗磷脂綜合征(APS)的主要特征是血清中抗磷脂抗體升高、血栓形成和(或)習慣性流產。β2糖蛋白I是一種磷脂結合蛋白，分子量為50kDa，由大約326個氨基酸殘基和5個同源的結構域組成。目前被認為是抗磷脂抗體在臨床上關系最密切的抗原靶點。

抗磷脂抗體是一組能直接與帶負電荷磷脂反應，存在于抗磷脂綜合征患者血清中的免疫球蛋白，其中一種為抗β2糖蛋白I抗體。抗β2糖蛋白I抗體通過抑制活化C蛋白、β2糖蛋白I、抗凝血酶III的抗凝活性，抑制依賴XII因子的纖溶作用，增加粘附分子表達、增強內皮細胞促凝活性，而介導血栓形成。因此，抗β2糖蛋白I抗體在血栓形成和抗磷脂綜合征中是比抗心磷脂抗體更特異的抗體，其還是男性動脈血栓形成(心肌梗死和卒中)重要的預測因子。

臨床檢測抗β2糖蛋白I抗體的常用方法有免疫印跡法、金標法、酶聯免疫吸附法，但這些方法都存在著一些不足之處。

一、免疫印跡法

免疫印跡是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。其不足之處在于：

(1)只能進行定性和半定量分析，無法得出被檢物質具體的量。

(2)操作步驟繁瑣，試驗用時較長。

(3)檢測的靈敏度還有待提高。

二、金標法

金標法是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，膠體金已經廣泛地應用于免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。

該方法快速、敏感性高，但其特異性差，假陽性率較高，且只能做定性檢測，不能定量。

三、酶聯免疫吸附法

酶聯免疫吸附法(ELISA)被廣泛應用于檢測抗β2糖蛋白I抗體，但該方法也存在著下述的不足之處：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔專用微孔板作為抗原包被用具和反應容器，在使用時只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，無法進行獨立的、單人份的檢測；

(2)定量測定所用的試劑種類較多，每一種檢測試劑都要用試劑瓶來盛裝，并且每使用一種試劑時都需要更換吸液嘴來分別加注到微孔板的微孔中，不但試劑瓶種類多，加注試劑的操作也極為繁瑣；

(3)缺少對檢測信息的相應標注，只能通過查看試劑盒外包裝盒的標識才能了解或知悉檢測試劑的生產批號及有效期信息，而且所知悉的信息在檢測過程中不受控，具有很大的隨意性；

(4)檢測試劑在檢測過程中處于開放的空間，容易引起各種試劑之間的交叉污染而影響檢測結果的準確性；

(5)檢測過程多采用手工操作，試劑或樣本的加量不很精確，操作過程極為繁瑣和復雜，容易發生操作差錯，檢測結果的準確度和精密度較差；

(6)在檢測項目成套試劑的數量配置及使用上均為項目數×48/96人份，如果需要檢測10個項目，則試劑的配置及使用數須為10×48/96人份，如果只有一份樣本需要檢測10個不同的項目，也需要配置10×48/96人份的試劑，存在著不夠經濟合理的缺點。

發明內容

本發明專利申請即是針對目前對于抗β2糖蛋白I抗體的檢測中存在的上述不足之處，提供一種能夠進行獨立單人份檢測的試劑裝置及其檢測方法。

本發明專利申請基于酶聯免疫檢測的原理來實現抗β2糖蛋白I抗體的檢測，是一種獨立的、單人份的、一次性的檢驗方法；進一步的，本發明申請還提供了與該方法配套的相應的試劑裝置，該試劑裝置將抗β2糖蛋白I抗體酶聯免疫檢測所需要的多種試劑盛裝在一個獨立的、多孔結構的試劑裝置內，通過分步加注移棄完成檢測步驟；進一步的，所述的試劑裝置還可以通過專用的免疫分析儀進行相應的全自動檢測。

本發明申請的目的之一是提供一種檢測抗β2糖蛋白I抗體的試劑裝置，該目的是通過下述的技術方案實現的：