[發明專利]一種溶菌酶制劑、其制備方法及用途

有效

• 申請號: 201110453880.4
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN103182075A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 劉繼東;王寧利;唐海;王征月
• 申請（專利權）人: 沈陽興齊眼藥股份有限公司
• 主分類號: A61K38/47
• 分類號: A61K38/47;A61K47/42;A61P27/02
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉海羅

技術領域

本發明屬于酶學和藥物制劑學領域，涉及一種溶菌酶制劑、其制備方法及用途。

背景技術

近年來，大量的眼科藥物制劑的臨床數據和研究資料表明，在眼部疾病的治療過程中產生的副作用或不良反應有很多時候都是由于抑菌劑造成的。例如，眼部手術后使用藥物進行術后治療時，由于抑菌劑的影響而造成的角膜上皮細胞脫落等現象時有發生。并且，隨著電腦、空調等的普及，干眼癥患者人群也在不斷增加，這類患者的治療往往需要長期輔以人工淚液，而化學抑菌劑的長期使用會造成不同程度的角膜損傷。

因此，眼用制劑中的抑菌劑帶來的副作用已成為社會普遍關注的問題，也是目前全球眼科藥物開發研究的熱點。現有技術中采用多種方法來避免抑菌劑對眼部帶來的傷害，如制成不含抑菌劑的眼科單劑量產品：如日本參天公司的可樂必妥滴眼液；也可以使用除菌的眼用制劑容器如：日本點眼劑研究所開發的烏諾前列酮異丙酯滴眼液。但這些包裝方面的改善并不能保證完全無菌，且成本高，對于長期使用的人群來說，無疑會增加患者的經濟負擔。

也有人嘗試過在喹諾酮類滴眼液中不加抑菌劑，直接依靠藥物的抗菌作用維持制劑的無菌狀態。但由于喹諾酮類藥物的抗菌譜及抑菌效力有限，其抑菌效果也不盡理想，不具備普遍應用性。

溶菌酶(Lysozyme)是分子量為14.4kDa的酶類，1922年Alexander?Fleming在尋找抗生素的過程中發現了溶菌酶。作為人體自身的抗感染天然屏障之一，它能夠通過催化肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖殘基間和殼糊精中N-乙酰葡糖胺殘基間的1，4-β鏈的水解，而破壞細菌的細胞壁，達到殺死細菌的目的，因此可以作為抑菌劑，已經在食物領域中得到應用。溶菌酶作為酶類具高效性，其抗菌活性為同類化學物質的幾十倍甚至上千倍；且作為人體固有活性物質，對人體無任何副作用，可應用于各類人群。除此之外，溶菌酶成本低廉、獲取途經多、來源廣闊，在蛋清、乳汁中都含有大量的溶菌酶，特別是近年來隨著克隆技術的廣泛應用，使得微生物提取溶菌酶也成為溶菌酶大量生產的一大途徑。

然而，溶菌酶在水中的穩定性較差，不能長時間保存。并且眼用制劑大多是水溶性制劑，因此溶菌酶應用于眼用制劑受到一定限制。

發明內容

本發明人經過深入的研究和創造性的勞動，獲得了一種溶菌酶制劑。本發明人驚奇地發現，該溶菌酶制劑能夠用于眼用制劑，并且溶菌酶在本發明的體系(包括合適的pH和穩定劑鹽類濃度)中能夠保持良好的穩定性。由此提供了下述發明：

本發明者綜合以上問題，尋找到一種對眼部安全、無刺激且高效的抑菌劑——溶菌酶，該抑菌劑可適用于各類人群，且成本低廉。溶菌酶作為一種眼用制劑的抑菌劑用量范圍為0.001％-25％(w/w)，優選范圍為0.01％-20％(w/w)，更優選為0.1％-15％(w/w)；進一步優選為0.3％-10％(w/w)，特別優選為0.5％-5％(w/w)。且在與其他抑菌劑聯合使用，可以使兩種抑菌劑的濃度同時降低，用量減小，降低其他抑菌劑對眼表的損害。

過去雖有人考慮到以其作為眼用制劑的抑菌劑，但由于其在水溶液中的穩定性不佳，使得溶菌酶在此方面的應用未能得到發展。為保證溶菌酶的穩定性，發明人通過大量的實驗，處理溶菌酶原料，使獲得的精制溶菌酶可在水溶液中保持3-5年穩定，攻克了這個難題。處理工藝如下：

1)將溶菌酶溶于注射用水，得到溶菌酶溶液；

2)向步驟1)中的溶菌酶溶液中加入穩定劑鹽類；

3)調節pH至4.6-9.0。

在本發明的一個實施方案中，還包括步驟4)靜置，使溶菌酶與穩定劑鹽類充分接觸后過濾；

在本發明的一個實施方案中，還包括5)加入吸附性物質對溶液中的雜質進行吸附，獲得澄清透明的溶液，吸附后過濾除去吸附性物質后備用。

在本發明的一個實施方案中，還包括6)得到的溶液可采用冷凍干燥、噴霧干燥等方式，使其以固體形式保存以備制劑用；亦可調節至等電點后，收集固體，采用真空干燥等方式，收集固體；亦可以液體形式加入其他藥物、滲透壓調節劑、保濕增稠劑等原輔料直接投料制成眼用制劑，例如滴眼液、眼膏劑、眼用凝膠劑、眼用固體制劑等劑型。

下面是對上述工藝的詳細解釋：

發明中所涉及到的眼用制劑的劑型可以為滴眼液、眼膏劑、眼用凝膠劑、眼用固體制劑等眼科常用的液體、半固體、固體劑型。