[發明專利]一種三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇/核酸腦靶向膠束及其制備方法

有效

• 申請號: 201110453577.4
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN103182087A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 姜同英;王思玲;高亦鯤
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K48/00;A61K9/10;A61P25/28
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 李宇彤

1.一種三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，所述的膠束由荷正電的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽與荷負電的核酸經靜電復合作用自組裝而成。

2.根據權利要求1所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽為殼聚糖依次經季銨化修飾得到三甲基殼聚糖，三甲基殼聚糖的胺基與兩端活化聚乙二醇的一個活性基團反應得到三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇，聚乙二醇另一活性基團與腦靶向功能肽反應RVG所得。

3.根據權利要求1所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，所述的殼聚糖重均分子量為10-150kD，脫乙酰度為80%–95%。

4.根據權利要求2所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，季銨化率為10%–99%，摩爾百分數。

5.根據權利要求2所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，所述聚乙二醇的通式為R₁-(CH₂CH₂O)_n-R₂，式中n=20–200，R₁為可與氨基反應生成聚乙二醇酰胺鍵的活性基團，包括琥珀酰亞胺基團、乙酸基團、乙醛基團、異氰酸基團、異氰硫酸基團、丙烯酸基團、硝基酚基團，R₂為可與巰基反應的活性基團，包括馬來酰亞胺基團、乙烯砜基團、硫醇基團。

6.根據權利要求1所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束，其特征在于，所述腦靶向功能肽為RVG，含有29個氨基酸，其序列為YTIWMPENPRPGTPCDIFTNSRGKRASNG。

7.一種如權利要求1所述的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽/核酸腦靶向膠束的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

殼聚糖的純化；

（2）三甲基殼聚糖的制備；

（3）三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇的制備；

（4）三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽的制備；

（5）三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽可與荷負電的核酸自組裝成腦主動靶向膠束。

8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中反應溫度為4–50℃，反應時間為3–480分鐘，聚乙二醇的接枝率為5%–35%（摩爾百分數）。

9.根據權利要求7中所述的制備方法，其特征在于，步驟（4）中：三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇在pH6–9的磷酸鹽緩沖液中與腦靶向功能肽RVG反應，反應溫度為15–30℃，反應時間為8–24小時。

10.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟（5）中，將三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽溶解于DEPC處理過的水中，然后通過0.22μm的濾膜除菌，將核酸溶于DEPC處理過的水中，將以上兩種溶液于室溫混合，渦旋5-30?s使之混合均勻。

11.根據權利要求7所述制備方法，其特征在于，所制備的膠束的粒徑分布為10–700nm，Zeta電位為+1mV–+15mV。

12.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，所制備膠束的三甲基殼聚糖-接枝-聚乙二醇-腦靶向功能肽與核酸的+/-電荷比為1:4?-?64:1。