[發(fā)明專利]一種高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110452812.6
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102539771A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王東
• 申請（專利權(quán)）人: 北京康美天鴻生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N21/64
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.一種高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1)合成熒光發(fā)射波長范圍為550～1300nm的量子點納米顆粒；

步驟2)用化學交聯(lián)或生物分子間特異性作用將配體和質(zhì)控分子連接到量子點表面，得到配體修飾的量子點和質(zhì)控分子修飾的量子點，混合均勻后得到量子點標記液；

步驟3)將弱熒光滲濾膜、極弱熒光吸水墊和極弱熒光扣卡按常規(guī)方法組裝成免疫滲濾裝置，在滲濾膜上設(shè)定質(zhì)控點和定量點；

步驟4)滴加樣本和量子點標記液進行免疫滲濾后，加緩沖液洗滌，檢測定量點和質(zhì)控點熒光信號強度，并以質(zhì)控點熒光信號強度校正定量點熒光信號強度，進而實現(xiàn)被測物的定量檢測。

2.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟1)所述量子點為單一化合物形成的量子點或是幾種化合物組裝成的復合物量子點。

3.如權(quán)利要求2所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，所述化合物是從ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、MgSe、ZnSe、PbSe、PbSe、CdTe、MgTe、ZnTe、HgTe、InAs、InP組成的組中選擇，且可摻雜Cu、Mn和Hg。

4.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟2)所述配體包含抗原、半抗原、多克隆抗體、單克隆抗體和激素受體。

5.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟2)所述配體修飾的量子點的熒光發(fā)射波長為800nm，質(zhì)控分子修飾的量子點的熒光發(fā)射波長為700nm。

6.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟2)配體修飾的量子點與質(zhì)控分子修飾的量子點的熒光發(fā)射波長均為630nm。

7.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟3)所述弱熒光滲濾膜在大于550nm時熒光很弱或不含熒光劑。

8.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟3)所述滲濾膜包含至少一個用于競爭或捕獲被測物的定量點，至少一個用于捕獲質(zhì)控分子的質(zhì)控點，且以加樣孔中心為圓心，定量點和質(zhì)控點處同心圓上。

9.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟3)所述極弱熒光吸水墊和極弱熒光扣卡均為未加熒光劑。

10.如權(quán)利要求1所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，步驟3)所述免疫滲濾裝置用于定量樣本中的至少一種被測物。

11.如權(quán)利要求10所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，所述被測物包括小分子、抗原、抗體、激素、抗生素、細菌或病毒及其他生化標志物。

12.如權(quán)利要求11所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，所述小分子包含藥物或毒品。

13.如權(quán)利要求11所述的高靈敏量子點免疫滲濾熒光定量檢測的方法，其特征在于，所述其他生化標志物包括心血管標志物、腫瘤標志物或自身免疫性疾病標志物。