[發明專利]黃精組培繁殖方法

無效

• 申請號: 201110450738.4
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102550409A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 趙勇彪;祝利;楊再江;向廷軍;何全慧
• 申請（專利權）人: 重慶市秀山紅星中藥材開發有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種中藥材栽培技術領域，特別是一種黃精的組培繁殖方法。

背景技術

黃精是百合科黃精屬多年生草本植物，有黃精，滇黃精和多花黃精等，其干燥根莖入藥。根據傳統醫藥經典記載，黃精屬于名貴中藥，具有寬中益氣、益腎填精、滋陰潤肺，生津補脾之功效。主治肺燥干咳、體虛乏力、心悸氣短、久病津虧口干、糖尿病、高血壓等病癥。對治療心血管疾病、結核病、慢性肝炎以及在抗菌、解毒、抗疲勞、抗衰老、降血糖、降血脂、抗腫瘤等方面均有較好作用，既可入藥，又可作為保健食品，自古以來，人們把黃精作為延年益壽的佳品，因而對黃精的需求量很大。

長期以來，黃精藥材來源主要以野生采集為主，黃精的栽培技術沒有引起更多的關注。隨著市場對藥材黃精需求量的增加和野生資源的急劇減少，采集野生黃精不但不能滿足市場需求，反而破壞了生態環境和黃精野生資源。由此人們逐漸開始對黃精的野生變家種栽培技術、高產栽培技術等加以實踐。目前黃精的繁殖技術主要為種子繁殖和根莖繁殖兩種方式。

由于黃精種子難收集，種子發芽率低，而且種子繁殖，育苗時間長，大大增加了黃精的栽培成本，不利于黃精的人工大面積種植。所以在當前的人工栽培中，繁殖主要依靠根莖繁殖，但該方法繁殖系數低，種根莖用量大，既不經濟，又限制了黃精的產量潛力，不便栽植管理推廣，因而擴大種植面積受到抑制。

發明內容

本發明的目的在于提供一種黃精組培繁殖方法，提高黃精的擴大繁殖速度，實現黃精栽培的規范化和規模化發展。為實現這一目的，發明人經過試驗，成功研究了繁殖黃精的各種組織培養基質配方和培養方法，對組織培養基質配方和生產工藝，以及黃精的特殊生長習性進行了大量研究和反復試驗，獲得了獨創的培養基配方和培養方法。

為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是黃精組培繁殖方法，包括引種滅菌、組織誘導、繼代培養、分化培養、壯苗培養和生根培養，具體方法如下。

引種滅菌：取帶芽的黃精根莖，用刀切成0.5-1.0cm的小段，放入洗潔精水溶液中浸泡5?分鐘，然后用自來水沖洗干凈；再用75％?乙醇擦洗表面，再用自來水沖洗干凈；然后進入超凈工作臺中操作，放入75％乙醇中半分鐘，滅菌去離子水涮洗兩次；再放入2.5％的次氯酸鈉中5分鐘，滅菌去離子水涮洗2次；接著又放入5％的次氯酸鈉中5分鐘，滅菌去離子水連續涮洗3-5次，然后用刀切去傷口壞死部分。

組織誘導：將消毒處理后的根莖接種在誘導培養基上，每瓶接種1-3塊，進行愈傷組織誘導培養，28-32天根莖切口處有少量愈傷組織開始萌動，50-60天出現淡黃色致密的愈傷組織，誘導率達50%。

繼代培養：將誘導產生的生長狀態良好的淡黃色顆粒狀的愈傷組織接種于繼代培養基中，每瓶接種2-3塊，進行繼代培養，第28-32天可觀察到繼代培養基中又有新的愈傷組織產生，第43-47天，可觀察到愈傷組織比原來增大1倍。

分化培養：將繼代增殖產生的生長狀態良好的淡黃色顆粒狀愈傷組織轉接到分化培養基上，每瓶接種2-3塊，進行分化培養，9-11天可觀察到愈傷組織開始生長分化，顏色變綠，19-21天可觀察到淡黃綠色不定芽，45-50天開始產生叢生芽，出芽率66%，平均每塊愈傷組織分化5個芽，芽的平均長度為12mm。

壯苗培養：將分化培養的叢生芽轉接到壯苗培養基中進行壯苗培養，30天可觀察到叢生芽發育成了2.0-4.0cm的叢生苗。

生根培養：將壯苗培養的叢生苗轉接到生根培養基上誘導生根，15天可觀察到苗根開始萌發，30天可觀察到86%的苗均生根，根須平均長度4cm，每株苗平均生根6條；然后可出瓶煉苗，移栽。

上述黃精組培繁殖方法中，所提到的各發育生長階段的培養條件是：人工氣候培養箱，光照周期起止時間是8:00-20:00，培養溫度日溫25℃，夜溫18℃，培養濕度是60%，光照強度是2000-2400lx。

上述黃精組培繁殖方法中，所提到的各發育生長階段的基本培養基是：MS+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂粉，PH值為5.8-6.0。

上述黃精組培繁殖方法中，所提到的各發育生長階段培養基的配方是。

誘導培養基：MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L。

繼代培養基：MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D2.0mg/L。

分化培養基：MS+6-BA3.0mg/L+IAA1.0mg/L。

壯苗培養基：MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.5mg/L。

生根培養基：MS+IAA0.5mg/L。