[發(fā)明專利]黃精組培繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110450738.4
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102550409A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙勇彪;祝利;楊再江;向廷軍;何全慧
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶市秀山紅星中藥材開發(fā)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.黃精組培繁殖方法，包括引種滅菌、組織誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)，其特征在于具體方法如下：

引種滅菌：取帶芽的黃精根莖，用刀切成0.5-1.0cm的小段，放入洗潔精水溶液中浸泡5?分鐘，然后用自來水沖洗干凈；再用75％?乙醇擦洗表面，再用自來水沖洗干凈；然后進(jìn)入超凈工作臺中操作，放入75％乙醇中半分鐘，滅菌去離子水涮洗兩次；再放入2.5％的次氯酸鈉中5分鐘，滅菌去離子水涮洗2次；接著又放入5％的次氯酸鈉中5分鐘，滅菌去離子水連續(xù)涮洗3-5次，然后用刀切去傷口壞死部分；

組織誘導(dǎo)：將消毒處理后的根莖接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，每瓶接種1-3塊，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，28-32天根莖切口處有少量愈傷組織開始萌動，50-60天出現(xiàn)淡黃色致密的愈傷組織；

繼代培養(yǎng)：將誘導(dǎo)產(chǎn)生的生長狀態(tài)良好的淡黃色顆粒狀的愈傷組織接種于繼代培養(yǎng)基中，每瓶接種2-3塊，進(jìn)行繼代培養(yǎng)，第28-32天可觀察到繼代培養(yǎng)基中又有新的愈傷組織產(chǎn)生，第43-47天，可觀察到愈傷組織比原來增大1倍；

分化培養(yǎng)：將繼代增殖產(chǎn)生的生長狀態(tài)良好的淡黃色顆粒狀愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，每瓶接種2-3塊，進(jìn)行分化培養(yǎng)，9-11天可觀察到愈傷組織開始生長分化，顏色變綠，19-21天可觀察到淡黃綠色不定芽，45-50天開始產(chǎn)生叢生芽，平均每塊愈傷組織分化5個芽，芽的平均長度為12mm；

壯苗培養(yǎng)：將分化培養(yǎng)的叢生芽轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，30天可觀察到叢生芽發(fā)育成了2.0-4.0cm的叢生苗；

生根培養(yǎng)：將壯苗培養(yǎng)的叢生苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，15天可觀察到苗根開始萌發(fā)，30天可觀察到86%的苗均生根，根須平均長度4cm，每株苗平均生根6條；然后可出瓶煉苗，移栽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃精組培繁殖方法，其特征在于組培過程中各發(fā)育生長階段的培養(yǎng)條件是：人工氣候培養(yǎng)箱，光照周期起止時間是8:00-20:00，培養(yǎng)溫度日溫25℃，夜溫18℃，培養(yǎng)濕度是60%，光照強(qiáng)度是2000-2400lx。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃精組培繁殖方法，其特征在于組培過程中各發(fā)育生長階段的基本培養(yǎng)基是：MS+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂粉，PH值為5.8-6.0。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃精組培繁殖方法，其特征在于組培過程中各發(fā)育生長階段培養(yǎng)基的配方是：

誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L；

繼代培養(yǎng)基：MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D2.0mg/L；

分化培養(yǎng)基：MS+6-BA3.0mg/L+IAA1.0mg/L；

壯苗培養(yǎng)基：MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.5mg/L；

生根培養(yǎng)基：MS+IAA0.5mg/L。