[發(fā)明專利]一種從羊躑躅提取物中制備鬧羊花素III的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110450609.5
• 申請(qǐng)日: 2011-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103183651A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁爽;熊智;鞠家星;王源;馮怡;阮克鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海張江中藥現(xiàn)代制劑技術(shù)工程研究中心
• 主分類號(hào): C07D303/14
• 分類號(hào): C07D303/14
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種鬧羊花素III的制備方法，特別是涉及一種從羊躑躅提取物中分離制備鬧羊花素III的方法。

背景技術(shù)

羊躑躅Rhododendron?molle?G..?Don為杜鵑花科植物，分布于我國(guó)長(zhǎng)江流域至南部各地，生長(zhǎng)于山坡、灌叢或草叢中，具有祛風(fēng)、止咳、散瘀和止痛等功效，用于風(fēng)寒濕痹，跌打損傷，痔漏，癬瘡。

鬧羊花素III是存在于羊躑躅中的一類化合物，被證明具有較好的降壓和減慢心率等作用，是羊躑躅的主要活性成分，曾在臨床上用作降血壓藥（天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，1999,?11(5):109-113）。目前，未見(jiàn)到鬧羊花素III的制備工藝的相關(guān)報(bào)道，因此，鬧羊花素III分離手段的不足是限制其醫(yī)藥用途的一個(gè)主要原因。鬧羊花素III結(jié)構(gòu)式如下。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從羊躑躅提取物中分離制備鬧羊花素III的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中制備手段繁瑣，產(chǎn)率極低的技術(shù)問(wèn)題。?

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明從羊躑躅提取物中分離制備鬧羊花素III的方法，包括步驟：

（1）大孔樹(shù)脂純化步驟

將羊躑躅提取物通過(guò)大孔樹(shù)脂分離，分別以純水、體積比為30%乙醇-水、60%乙醇-水、95%乙醇-水洗脫，每個(gè)部分洗脫6-10?BV，洗脫液作TLC檢識(shí)，鬧羊花素III在30?%乙醇-水部位，減壓回收30%乙醇-水部位，得純化的浸膏B；

（2）反相C₁₈色譜純化步驟

將步驟（1）所得的浸膏B用反相硅膠柱色譜分離，分別以體積比為20%、30%、40%的甲醇-水溶液洗脫，每個(gè)部分洗脫6-10?BV，洗脫液作TLC檢識(shí)，合并含有鬧羊花素III的流份，減壓回收溶劑，即得純化的鬧羊花素III。

其中，所述步驟（1）中的羊躑躅是分別以6-10倍體積，濃度比為0%-95%的乙醇-水提取回流2-3次，每次1-2小時(shí)。

采用本發(fā)明的方法依次經(jīng)（1）大孔吸附樹(shù)脂純化（2）反相色譜純化，能極大地提高得率，因此，該方法是一種制備鬧羊花素III的簡(jiǎn)化工藝，可用于鬧羊花素III的工業(yè)制備。

附圖說(shuō)明

圖1是鬧羊花素III的¹H-NMR圖。????

圖2是鬧羊花素III的¹³C-NMR圖。

圖3是鬧羊花素III的DEPT圖。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例1?鬧羊花素III的制備

羊躑躅藥材1?kg，去除雜質(zhì)后粉碎成粗粉，以10、10、10倍的純水提取回流三次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收得浸膏A為45?g。

將浸膏A用大孔吸附樹(shù)脂柱色譜分離（浸膏樣品與大孔吸附樹(shù)脂重量比為1:30，大孔吸附樹(shù)脂柱規(guī)格Φ?100*1000?mm），并以純水、體積比為30%乙醇-水、60%乙醇-水、95%乙醇-水洗脫，每個(gè)部分洗脫8BV，將洗脫液薄層硅膠板（GF₂₅₄）點(diǎn)樣，以體積比為7:3:0.5的氯仿-甲醇-水溶液展開(kāi)后用體積比為10%的硫酸-乙醇溶液顯色，減壓回收含有鬧羊花素III的部分，得浸膏B約5?g。將浸膏B用反相C₁₈硅膠柱色譜分離（浸膏樣品與C₁₈硅膠重量比為1:50，硅膠柱規(guī)格Φ?60*600?mm），以體積比為20%、30%、40%的甲醇-水溶液洗脫，每個(gè)部分洗脫10?BV，洗脫液作TLC檢識(shí)，合并含有鬧羊花素III的流份，減壓回收溶劑，即得純化的鬧羊花素III?0.32g。

最終所得鬧羊花素III經(jīng)常規(guī)公知的NMR方法鑒定【Phytochemistry,?1991,?30(6):1797-1800】，并經(jīng)ELSD檢測(cè)【Kromasil-C_18?柱(4.6?mm*250?mm)，霧化溫度為40℃，蒸發(fā)溫度為60℃，流動(dòng)相為體積比30:70的水-甲醇溶液，流速1.5?mL·min^-1，進(jìn)樣量10?μl，柱溫?25℃】含量在98%以上，其得率為0.032%。

實(shí)施例2?鬧羊花素III的制備

羊躑躅藥材1?kg，去除雜質(zhì)后粉碎成粗粉，以8、6、6倍的濃度比為70?%提取回流三次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，減壓回收得浸膏A為55?g。