[發明專利]中藥蟾酥提取物及其制備方法

有效

• 申請號: 201110449412.X
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102512453A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 何秀峰;劉冬;趙立敏
• 申請（專利權）人: 北京協和制藥二廠
• 主分類號: A61K35/56
• 分類號: A61K35/56;A61P35/00
• 代理公司: 北京天悅專利代理事務所(普通合伙) 11311
• 代理人: 田明;王瑛

技術領域

本發明屬于中藥提取技術領域，具體涉及一種中藥蟾酥提取物及其制備方法。

背景技術

藥用蟾蜍為兩棲綱蟾蜍科動物中華大蟾蜍(Bufo?bufogaraarizans?Cantor)或黑框蟾蜍(Bufo?meLanostictus?Schneider)。蟾酥為中華大蟾蜍或黑框蟾蜍的耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經加工干燥制成。中藥蟾酥的應用有幾千年的歷史，《本草匯言》中對蟾酥的描述為：蟾酥，通行十二經絡、藏府、膜原、溪谷、關節諸處。蟾酥，療疳積，消臌脹，解疔毒之藥也。能化解一切瘀郁壅滯諸疾，如積毒、積塊、積脹、內疔癰腫之證，有攻毒拔毒之功也。《本草求真》中描述為：蟾酥，味辛氣溫有毒，能拔一切風火熱毒之邪，使之外出。蓋邪氣著人肌肉，郁而不解，則或見為疔腫發背、陰瘡、陰蝕、疽癘惡瘡，故必用此辛溫以治，蓋辛主散，溫主行，使邪盡從汗出，不留內入，而熱自可以除矣。性有毒，止可外治取效；即或用丸劑，亦止二、三、四厘而已，多則能使毒人。其用作丸投服，亦宜雜他藥內，勿單服也。目前，中藥蟾酥仍廣泛應用于多個中成藥中，作為主要的功效成分，如：六神丸、牛黃消炎丸等。

蟾酥中的活性物質主要為酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈等多種脂溶性強心甾類化合物，在化學上屬于甾族化合物，而其C₁₇上再接一個α-吡喃酮基，凡具有此種骨架的物質，總名蟾蜍二烯內酯。《中國藥典》2010年版一部中蟾酥的質量標準中也以華蟾酥毒基及酯蟾毒配基的含量作為中藥蟾酥的含量測定指標。現代對于中藥蟾酥的藥理作用的研究，熱點主要集中在于其抗腫瘤、鎮痛和強心作用的分子藥理學機制方面。目前的主要研究結果表明，華蟾酥毒基、酯蟾毒配基及蟾毒靈三種脂溶性成分的混合物不但具有明顯的抗腫瘤作用，而且還能將腫瘤細胞轉化為正常細胞、誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞新生血管形成等作用。

中國專利申請“一種蟾酥提取物及其制備方法”(申請號為200710041880.7，公開號為CN101322723A，公告日為2008年12月17日)使用無水乙醇提取，提取物經硅膠柱分離，以一定比例的石油醚、丙酮等度洗脫的方法得到酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈三種脂溶性成分的混合物，其總量高于90％，但該方法采用提取溶劑為無水乙醇，其提取效率較低，分離所用的石油醚、丙酮的用量較大，對環境污染和破壞的程度也較大；等度洗脫的方法、洗脫劑的用量等都未作進一步考察，且轉移率也未進行公開；更為重要的是，該方法對中藥蟾酥提取物的干燥溫度以及時間未作規定，因在分離、純化過程中使用了有機溶劑，可能導致蟾酥提取物中殘留有大量的石油醚、丙酮等毒性有機溶劑，導致含量偏低且毒性大大增加。因此，從安全性和有效的角度考慮，三種蟾毒配基的總含量有待進一步提高，且對丙酮、石油醚等有機溶劑殘留量沒有進行檢查、測定。

發明內容

針對現有技術中存在的缺陷，本發明的一個目的是提供含酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈三種蟾毒配基混合物且三種蟾毒配基的重量百分比(按干燥品計算)之和為95％以上的中藥蟾酥提取物。

本發明的另一個目的是提供上述中藥蟾酥提取物的制備方法，采用該方法得到的中藥蟾酥提取物中酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈三種蟾毒配基混合物的重量百分比(按干燥品計算)為95％以上，提取效率更高，純化純度也顯著增加，提取物更加安全可靠，并且采用該方法，使用溶劑量更少，對環境的污染程度更低，操作簡便，易于工業化生產。

為達到以上目的，本發明采用的技術方案是：中藥蟾酥提取物，其特征在于，該提取物采用下述方法提取獲得：在60～90℃的溫度下將中藥蟾酥藥材用體積百分比為60％～95％的乙醇水溶液回流提取，將提取液濃縮后經硅膠柱分離，用體積比1～8∶1的石油醚與丙酮為洗脫劑進行等度洗脫，收集洗脫液，經過濾、濃縮、減壓干燥得到含有酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈三種蟾毒配基混合物且三種蟾毒配的重量百分比之和≥95％的中藥蟾酥提取物，所述的重量百分比按干燥品計算。

進一步，酯蟾毒配基、華蟾酥毒基及蟾毒靈三種蟾毒配基混合物占中藥蟾酥提取物的重量百分比為96～100％。

本發明提供的上述中藥蟾酥提取物的制備方法，包括以下步驟：

(1)在60～90℃的溫度下，將中藥蟾酥藥材用體積百分比為60％～95％的乙醇水溶液作為提取溶劑回流提取，每次提取時中藥蟾酥藥材與提取溶劑的比例為1g∶5～25mL，提取時間為30～90分鐘，提取次數為2～4次；