[發明專利]用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒

有效

• 申請號: 201110449120.6
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102517213A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 李文欣
• 申請（專利權）人: 遼寧邁迪生物科技有限公司
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12N5/0783
• 代理公司: 沈陽科威專利代理有限責任公司 21101
• 代理人: 刁佩德

1.?一種用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：試劑盒內容物中包括：

用于盛裝液體的無菌離心管；

用于吸放液體的無菌移液管；

用于分選細胞的細胞分選液；

用于誘導T淋巴細胞細胞分化的包被瓶，所述包被瓶中預先包被了CD3單克隆抗體、γ-干擾素、白細胞介素-1α；

用于刺激T淋巴細胞分裂增殖的細胞因子A、細胞因子B，所述細胞因子A的成分為20萬單位的白細胞介素-2，所述細胞因子B的成分為200萬單位的白細胞介素-2；

用于作為培養細胞容器的無菌細胞培養袋；

用于為細胞生長提供營養的無血清培養基；

用于吸放液體的無菌注射器；

用于作為漏斗轉接液體的無菌注射器；

用于檢菌的雙向血培養瓶；

用于防止細胞聚集的細胞分散劑；

用于過濾細胞團的無菌過濾網；

用于盛裝細胞懸液的回輸袋；

用于標注回輸信息的標簽。

2.根據權利要求1所述的用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：所述用于誘導T淋巴細胞細胞分化的包被瓶的制備方法為：取CD3單克隆抗體、γ-干擾素、白細胞介素-1α加入到40ml磷酸鹽緩沖液中，CD3單克隆抗體、γ-干擾素、白細胞介素-1α三種因子的濃度比例為10:1:1，制成總濃度為1200ng/ml的混合溶液，充分混勻；將該混合溶液加入到600ml培養瓶中，4℃靜置至少24小時，制成初始包被瓶；將初始包被瓶在-40℃條件下冷凍24小時；啟動冷凍干燥機的壓縮機，使機器腔室內的溫度降至-40℃，將包被瓶瓶口擰松，放入干燥室；開啟真空泵，使壓力達到<15Pa，真空凍干20小時；打開CO₂進氣閥，關閉真空泵；待壓力到110K后關閉CO₂進氣閥，取出包被瓶，擰緊蓋子，封好口，4℃保存；在規定的保質期內使用。

3.根據權利要求1所述的用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：所述細胞因子A的使用濃度為0.4萬單位/ml，細胞因子B的使用濃度為0.2萬單位/ml。

4.根據權利要求1所述的用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：所述細胞分選液的配制方法為：取9%?Ficoll溶液720ml與33.4%泛影葡胺30ml充分混合，再向該混合液中加入7.5g的明膠，充分混勻；用高濃度的泛影葡胺或稀釋的Ficoll來調整溶液的相對密度至1.077g/ml；最后放入溫度為121℃的高壓蒸汽滅菌中30min，室溫保存備用。

5.根據權利要求1所述的用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：所述細胞分散劑為10%的人血清白蛋白。

6.根據權利要求1所述的用于T淋巴細胞的體外培養試劑盒，其特征在于：用于處理人外周血、臍帶血、胸水、腹水中的單個核細胞的體外定向分選、誘導、分化、培養、擴增。