[發(fā)明專利]通用ACTB基因熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑盒無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201110448551.0 | 申請(qǐng)日: | 2011-12-29 |
| 公開(公告)號(hào): | CN102517395A | 公開(公告)日: | 2012-06-27 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 劉欽松;夏慶杰 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 山東博奧克生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/68 | 分類號(hào): | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 252000 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 通用 actb 基因 熒光 定量 聚合 鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 試劑盒 | ||
1.一種操作簡(jiǎn)單、快速,能夠有效定量擴(kuò)增檢測(cè)人、大鼠、小鼠的ACTB基因表達(dá)的DNA熒光定量體外擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒;其中包含ACTB特異的引物、探針和耐熱DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、鎂離子、PCR緩沖液、超純水等組成的PCR擴(kuò)增緩沖反應(yīng)體系,以及標(biāo)準(zhǔn)ACTB模板。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通用ACTB基因熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑盒,其特征在于:所用引物和探針序列分別為:上游引物P1:5’-GAA?GAT?CAA?GAT?CAT?TGC?TCC?T-3’(SEQ?ID?NO:1);下游引物P2:5’-TGG?ATC?AGC?AAG?CAG?GAG?TA-3’(SEQ?ID?NO:2);TaqMan探針序列:5’-FAM-CTG?TCC?ACC?TTC?CAG?CGA-TAMRA-3’(SEQ?ID?NO:3)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通用ACTB基因熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑盒,其特征在于:特異的引物和探針每條0.28umol/L、Taq?DNA聚合酶1.5/50ul、dNTPs底物0.25mmol/L、模板cDNA若干、Mg2+2.5mmol/L、緩沖液1×PCR;其中1×PCR緩沖液包括50mmol/L?KCl、10mmol/L?Tris·HCl?PH?8.3、0.01%明膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通用ACTB基因熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑盒,其特征在于:標(biāo)準(zhǔn)ACTB基因模板序列為:5’-GAAGATCAAGATCATTGCTCCTCCTGAGCGCAAGTACTCTGTGTGGATTGGTGGCTCTATCCTGGCCTCACTGTCCACCTTCCAGCAGATGTGGATCAGCAAGCAGGAGTA-3’(SEQID?NO:4);其濃度分別為10E+8/ML、10E+7/ML、10E+6/ML、10E+5/ML、10E+4/ML。
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