[發明專利]一種生產乙醇的光合微生物無效
| 申請號： | 201110443700.4 | 申請日： | 2011-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN102994392A | 公開（公告）日： | 2013-03-27 |
| 發明（設計）人： | 范文俊;鄭曉光 | 申請（專利權）人： | 浙江齊成碳能科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/13 | 分類號： | C12N1/13;C12N15/74;C12P7/06;C12R1/89 |
| 代理公司： | 北京漢昊知識產權代理事務所(普通合伙) 11370 | 代理人： | 黃可峻 |
| 地址： | 310013 *** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生產 乙醇 光合 微生物 | ||
1.一種利用光合作用生產乙醇的基因工程藍藻，其含有整合到染色體上的外源基因，所述外源基因為丙酮酸脫羧酶基因和乙醇脫氫酶基因，其中所述丙酮酸脫羧酶基因編碼的丙酮酸脫羧酶具有對應于SEQ?ID?NO.1的氨基酸序列，以及所述乙醇脫氫酶基因編碼的乙醇脫氫酶具有對應于SEQ?ID?NO.3的氨基酸序列。
2.權利要求1的基因工程藍藻，其中所述丙酮酸脫羧酶基因選自來源于運動發酵單胞菌，以及乙醇脫氫酶來源于聚球藻。
3.權利要求1-2中任一項的基因工程藍藻，其中所述丙酮酸脫羧酶基因具有SEQ?ID?NO.2的核酸序列，其中所述乙醇脫氫酶基因具有SEQ?ID?NO.4的核酸序列。
4.權利要求中1-3任一項的基因工程藍藻，其選自集胞藻屬、隱球藻屬、魚腥藻屬、念珠藻屬、顫藻屬、聚球藻屬、球藻屬、阿格藻屬、雙歧藻屬和鞭枝藻屬，優選為集胞藻屬，最優選為集胞藻PCC6803。
5.權利要求1-4任一項的所述的基因工程藍藻，其生產的乙醇由細胞中擴散到培養液中，溶液中乙醇濃度達到0.5g/L，優選的，達到1.5到5g/L。
6.權利要求1-5任一項的基因工程藍藻，其保藏號為CGMCC?No.5531。
7.制備權利要求1-6中任一項的基因工程藍藻的方法，其包括將外源丙酮酸脫羧酶基因和乙醇脫氫酶基因，以及表達丙酮酸脫羧酶和乙醇脫氫酶基因所需啟動子導入，并整合到藍藻染色體上。
8.用權利要求1-6中任一項的基因工程藍藻制備乙醇的方法。
9.一種載體，其包括：
(a)核酸，其包含丙酮酸脫羧酶基因和乙醇脫氫酶基因，其中所述丙酮酸脫羧酶基因編碼的丙酮酸脫羧酶具有對應于SEQ?ID?NO.1的氨基酸序列，以及，其中所述乙醇脫氫酶基因編碼的乙醇脫氫酶具有對應于SEQ?ID?NO.3的氨基酸序列；和
(b)啟動子，所述啟動子與所述丙酮酸脫羧酶和乙醇脫氫酶基因可操作地連接。
10.權利要求9的載體，其中所述丙酮酸脫羧酶基因具有SEQ?ID?NO.2的核酸序列，其中所述乙醇脫氫酶基因具有SEQ?ID?NO.4的核酸序列。
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