[發(fā)明專利]丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110443053.7
• 申請日: 2011-12-27
• 公開（公告）號: CN102928593A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發(fā)明（設計）人: 陳立柱;楊利
• 申請（專利權）人: 北京寶瑞源科技孵化有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于由樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊和PVC支撐板組成，樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜和吸樣墊緊密粘附在PVC支撐板上；所述樣品墊為玻璃纖維；所述膠體金墊為膠體金標記的丁丙諾啡單克隆抗體聚酯膜；所述硝酸纖維素膜上依次包被了丁丙諾啡-BSA偶聯(lián)抗原作為檢測線(T線)，羊抗鼠IgG多克隆抗體作為質控線(C線)；所述吸樣墊為吸水紙。

2.一種權利要求1所述的丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的丁丙諾啡單克隆抗體由丁丙諾啡-BSA偶聯(lián)抗原作為免疫原免疫BALB/C小鼠獲得。

3.一種權利要求1所述的丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金的制備方法為：取90ml純化水于潔凈的圓底燒瓶中，于電磁加熱套中攪拌并加熱，等待沸騰后，加入4ml?1％的氯化金溶液，繼續(xù)攪拌1min，迅速加入6ml?1％的檸檬酸三鈉，溶液顏色由淺黃變成黑色最后變成酒紅色，繼續(xù)加熱5min，取出冷卻到室溫，常溫避光保存。這樣制成的膠體金顆粒的大小為20-40nm。

4.一種權利要求1所述的丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金墊的制備方法為：取顆粒大小為20-40nm的膠體金溶液，用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調至7.0-9.0，室溫放置10分鐘；在上述溶液中加入丁丙諾啡單克隆抗體，使丁丙諾啡單克隆抗體的濃度為20-80μg/ml膠體金，混合均勻后，室溫放置30分鐘；加入10％的BSA溶液使其濃度為10-60μl/ml，混合均勻，室溫放置10分鐘；12000轉離心30分鐘，仔細吸取上清液，棄去，剩余的沉淀用初始膠體金體積的膠體金復溶液溶解；12000轉離心30分鐘，仔細吸取上清液，棄去，剩余的沉淀用30％-100％初始膠體金體積的膠體金復溶液溶解，得到丁丙諾啡單克隆抗體-膠體金標記物；將丁丙諾啡單克隆抗體-膠體金標記物按1mL鋪40-70cm²聚酯膜的比例均勻鋪在聚酯膜上，再置干燥間，在溫度38℃，濕度小于30％的條件下干燥24±2小時，制成膠體金墊。

5.一種權利要求1及權利要求5所述的丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金復溶液為含0.01-0.1％的Tris，1.0-3.0％的蔗糖、0.1-1.0％的BSA的0.02M?pH7.0-9.0的磷酸鹽緩沖溶液。

6.一種權利要求1所述的丁丙諾啡檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的硝酸纖維素膜上的兩條線的包被方法為：設定劃膜儀涂覆參數1μL/cm，分別用微量進樣器取濃度為1.0-5.0mg/ml的丁丙諾啡-BSA偶聯(lián)抗原、取濃度為0.5-3.0mg/ml羊抗鼠IgG多克隆抗體，按順序接到劃膜儀的A、B管道接口。將貼有硝酸纖維素膜的PVC板置于劃膜儀的往復運動平臺上，開啟劃膜儀，在硝酸纖維素膜上涂覆丁丙諾啡-BSA偶聯(lián)抗原(T線)、羊抗鼠IgG多克隆抗體(C線)。劃線后于溫度38℃的烘箱中干燥24±2小時，保存，備用。