[發明專利]胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法

無效

• 申請號: 201110439792.9
• 申請日: 2011-12-23
• 公開（公告）號: CN102565391A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 王滔
• 申請（專利權）人: 王滔
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 丁秀麗

1.一種胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，它包括：

(a)制作帶檢測物質的樣品稀釋液；

(b)把樣品稀釋液中的胃黏膜樣品與抗幽門螺桿菌抗原的第一種多克隆抗體接觸以形成抗體-抗原復合體；

(c)把步驟(b)的樣品和步驟(b)所得到的抗體-抗原復合體進行分離；

(d)把步驟(c)得到的分離后的抗體-抗原復合體暴露于抗幽門螺桿菌抗原的第二種多克隆抗體并把抗幽門螺桿菌抗原的第二種多克隆抗體的一部分與復合體反應，其中所述的第一種多克隆抗體和第二種多克隆抗體中的其中一種多克隆抗體結合在一種固體載體上，而另一種多克隆抗體用一種檢測劑進行標記；

(e)測定標記的抗體的量；

其特征在于：所示的樣品稀釋液制作方式為把懷疑含有幽門螺桿菌的一種胃黏膜樣品懸浮于基于蛋白質的、含堿性物質的稀釋液中。

2.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：所述的樣品稀釋液是一種基于蛋白質的稀釋液，樣品稀釋液為含有選自胎牛血清、正常山羊血清、豚鼠血清、馬血清、酪蛋白、白蛋白、明膠和牛血清白蛋白中的一種蛋白的樣品稀釋液。

3.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：在樣品稀釋液內還含有為降低胃黏膜所含酸液對檢測的影響而添加的含堿性物質。所述的堿性物質包含但不限于三羥甲基甲胺基丙磺酸、N，N-雙(2-羥乙基)甘氨酸、三羥甲基氨基甲烷、N-三-(羥甲基)甲基氨基乙酸、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸半鈉鹽、N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、3-(N-嗎非啉)乙磺酸、四硼酸鈉緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或多種組合，其中由堿性物質配制而成的緩沖液其pH大于8。

4.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：步驟(d)中抗體-抗原復合體暴露給第二種多克隆抗體的一部分反應后，用一種能夠降低交叉反應度或以其它方式提高該測定法特異性的緩沖液洗滌該復合體。

5.根據權利要求4的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液。

6.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：步驟(d)中的檢測劑選自堿性磷酸酶和β-半乳糖苷酶、辣根過氧化物酶、放射性物質(如碘-125)、膠體金、膠體顆粒(金、硒等)、彩色乳膠微球、分散染料顆粒中的一種或多種組合。

7.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：固體載體為酶標反應板或纖維素膜。

8.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：樣品稀釋液的PH為6～10，其中最優值為PH＝8。

9.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：在樣品稀釋液中還含有胃蛋白酶抑制劑，所述的胃蛋白酶抑制劑包含但不限于抑肽素、硫柳汞中的一種或幾種的混合物。

10.根據權利要求1的胃黏膜樣品中幽門螺桿菌的免疫測定法，其特征在于：步驟(e)中的還添加有顯色液。