[發明專利]一種納米凝血酶及其制備方法

在審

• 申請號: 201110436302.X
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN103169957A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 聶廣軍;李素萍;吳雁;張嘉坤;趙穎
• 申請（專利權）人: 國家納米科學中心
• 主分類號: A61K38/48
• 分類號: A61K38/48;A61K47/36;A61K47/26;A61K9/14;A61P7/04
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王浩然;周建秋

1.一種納米凝血酶，其特征在于，所述納米凝血酶為核殼結構，所述核為凝血酶，所述殼為由水溶性聚陰離子和季銨化殼聚糖的陽離子交聯形成的納米粒子。

2.根據權利要求1所述的納米凝血酶，其中，所述納米粒子的粒徑為150-210nm。

3.根據權利要求1或2所述的納米凝血酶，其中，所述納米凝血酶的包封率為50-78％。

4.根據權利要求1-3中任意一項所述的納米凝血酶，其中，所述季銨化殼聚糖的分子量在200kDa以上。

5.根據權利要求1-4中任意一項所述的納米凝血酶，其中，所述水溶性聚陰離子為葡聚糖磺酸根離子、透明質酸根離子和海藻酸根離子中的任意一種。

6.一種納米凝血酶的制備方法，所述方法包括：

(1)將季銨化殼聚糖水溶液與凝血酶水溶液接觸得到混合溶液，季銨化殼聚糖水溶液和凝血酶水溶液的用量為，每9mg的季銨化殼聚糖對應2-10U的凝血酶；

(2)在18-25℃持續攪拌狀態下，向所述混合溶液中勻速滴加水溶性聚陰離子水溶液，水溶性聚陰離子水溶液以聚陰離子計，混合溶液以季銨化殼聚糖計，水溶性聚陰離子水溶液與混合溶液的質量比為1∶3-10；

(3)加入水溶性聚陰離子水溶液后在18-25℃下繼續攪拌25-35min，得到納米凝血酶懸液。

7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述方法還包括步驟(4)：將所述納米凝血酶懸液以10000-15000r/min的速度離心，離心后得到的固體即為納米凝血酶。

8.根據權利要求6或7所述的方法，其中，所述季銨化殼聚糖水溶液的濃度為4-6mg/mL。

9.根據權利要求6-8中任意一項所述的方法，其中，所述季銨化殼聚糖的分子量在200kDa以上。

10.根據權利要求6-9中任意一項所述的方法，其中，所述凝血酶水溶液的濃度為10-50U/mL。

11.根據權利要求6-10中任意一項所述的方法，其中，所述水溶性聚陰離子水溶液的濃度為2-5mg/mL。

12.根據權利要求6-11中任意一項所述的方法，其中，所述水溶性聚陰離子為葡聚糖磺酸根離子、透明質酸根離子和海藻酸根離子中的任意一種。