[發明專利]一種柱層析法制備高純甘油磷脂酰乙醇胺的方法

有效

• 申請號: 201110436224.3
• 申請日: 2011-12-23
• 公開（公告）號: CN102532190A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 劉元法;周麗;張康逸;王興國
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C07F9/10
• 分類號: C07F9/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種柱層析法制備高純甘油磷脂酰乙醇胺(L-alpha?glycerylphosphorylethanolamine，L-α-GPE)的方法，是以大豆粉末磷脂為原料，利用離子交換樹脂柱層析法純化分離出L-α-GPE的方法。在醇相體系中，采用甲醇鈉催化粉末磷脂進行化學醇解反應；醇解混合液調節pH后，首先將醇解混合液上樣至在非水介質中穩定性較好的強陽離子交換樹脂(無水醇相平衡)層析柱，在流速為1～2mL/min的流速下，經過吸附、甲醇洗脫及水解吸的先后程序，將L-α-GPC和L-α-GPE從醇解混合液中分離出來；接著將L-α-GPC和L-α-GPE的混合液經過強陰離子交換樹脂(水平衡)層析柱，在1～2mL/min的流速下經過柱的吸附與特定解吸液的解吸，將L-α-GPE從柱中解吸出來，最后經過減壓蒸餾和真空干燥，得到淺黃色透明高黏度液體，即為甘油磷脂酰乙醇胺產品，其純度可達98％以上。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于包括以下幾個步驟：

(1)化學醇解法反應制備L-α-GPE：將粉末磷脂加入無水甲醇體系中，固液比1∶2～1∶10(g/ml)，0～70℃油浴中攪拌均勻后，加入1％～5％的甲醇鈉催化劑，反應2～20h，過濾，所得清液即為含有L-α-GPE的醇解混合液。

(2)醇解混合液調節至適當pH后，上樣至甲醇平衡的在醇相中穩定性較好的強酸型陽離子交換樹脂層析柱，先用甲醇沖洗至柱中無雜質，然后采用中性的水對柱進行解吸，所得解吸液中主要成分為L-α-GPE和L-α-GPC，將L-α-GPE和L-α-GPC從混合液中分離出來；

(3)上述解吸液再經過水平衡的強陰離子交換樹脂層析柱，先用水沖洗至L-α-GPC完全流出，然后采用1％乙酸對柱進行解吸，所得解吸液于60℃下減壓蒸餾，得到淺黃色透明高黏度液體，即為L-α-GPE產品。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于以大豆粉末磷脂為原料，在無水醇相體系中，采用甲醇鈉作為催化劑，反應制備L-α-GPE。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于采用甲醇浸泡的強陽離子交換樹脂作為第一層析柱的分離介質。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于采用中性的水對第一層析柱進行解吸。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于采用水浸泡的強陰離子交換樹脂作為第二層析柱的分離介質。

7.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于采用1％乙酸對第二層析柱進行解吸。

8.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于從第二層析柱上先分離出L-α-GPC，后解吸出產品L-α-GPE。