[發明專利]一種用于檢測免疫不育相關自身抗體的新型抗原無效
| 申請號: | 201110435317.4 | 申請日: | 2011-12-22 |
| 公開(公告)號: | CN103175952A | 公開(公告)日: | 2013-06-26 |
| 發明(設計)人: | 蘭風華 | 申請(專利權)人: | 蘭風華 |
| 主分類號: | G01N33/531 | 分類號: | G01N33/531 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 350025 福建省福州市*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 檢測 免疫 不育 相關 自身抗體 新型 抗原 | ||
1.本研究將從人睪丸λTripEx?cDNA文庫中克隆的人精子特異性乳酸脫氫酶(sperm-specific?lactate?dehydrogenases,?LDH-C4)與高效原核表達載體pET-28a(+)連接,構建了pET-28(a+)-hLDHC重組質粒,將此質粒轉化入大腸桿菌Ecol.BL21(DE3)plysS溶原菌中表達,在0.1mM?IPTG誘導下可高效表達可溶性的rhLDH-C4蛋白,經Ni+-NTA親和層析法純化并用透析帶濃縮后,濃度可達1.0mg/ml,1000ml菌液共可獲得目的蛋白約1.5mg;以此純化蛋白作為包被抗原建立人血清抗LDH-C4抗體(IgG型)檢測的間接ELISA方法,為準確的檢測不育患者體內的自身抗體(LDH-C4抗體)提供一種可靠的臨床參考指標;故要求如下:
(1)pET-28(a+)-hLDHC原核重組載體的保存及使用。
2.(2)?rhLDH-C4重組蛋白的誘導表達及純化技術。
3.(3)?rhLDH-C4純化蛋白在臨床上的應用以及以此為原料開發新的試劑盒。
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