[發明專利]高青蒿素含量轉基因青蒿植株的生產方法

無效

• 申請號: 201110430810.7
• 申請日: 2011-12-20
• 公開（公告）號: CN102776212A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 唐克軒;陸續;張凌;沈乾;高爾娣;江偉民;張芳源;呂宗友
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/52
• 分類號: C12N15/52;C12N15/82;C12Q1/68;A01H5/00;G01N30/02
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國中

1.一種高青蒿素含量轉基因青蒿植株的生產方法，其特征在于，包括如下步驟：從青蒿中克隆ADS，CYP71AV1和CPR三個基因，構建含ADS，CYP71AV1和CPR三基因的植物表達載體，用根癌農桿菌介導，將ADS，CYP71AV1和CPR三基因轉入青蒿并再生出植株，篩選，獲得青蒿素含量提高的轉基因青蒿植株。

2.如權利要求1所述的高青蒿素含量轉基因青蒿植株的生產方法，其特征在于，所述篩選包括如下步驟：PCR檢測外源目的基因ADS，CYP71AV1和CPR三基因的整合情況，高效液相色譜法及蒸發光散射檢測器測定轉基因青蒿中青蒿素的含量。

3.如權利要求2所述的高青蒿素含量轉基因青蒿植株的生產方法，其特征在于，所述PCR檢測為：設計合成35S和ADS，CYP71AV1和CPR基因的引物，進行DNA擴增，紫外線下觀察到目的條帶的株系即為轉基因青蒿植株。

4.如權利要求2所述的高青蒿素含量轉基因青蒿植株的生產方法，其特征在于，所述高效液相色譜法及蒸發光散射檢測器測定青蒿植株中青蒿素含量，測定條件為：色譜柱C-18反相硅膠柱，流動相為甲醇∶水，甲醇∶水的體積比為70∶30，柱溫為30℃，流速1.0mL/min，進樣量10μL，蒸發光散射檢測器漂移管溫度40℃，放大系數為7，載氣壓力5bar。