[發(fā)明專利]一種黑果枸杞多糖的分離純化方法及分離得到的五種多糖

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110428206.0
• 申請(qǐng)日: 2011-12-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103159864A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜昱光;彭強(qiáng);許青松;李曙光;王仲孚;王文霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種黑果枸杞多糖的分離純化方法，其特征在于：黑果枸杞加水勻漿、超聲加熱法提取、過(guò)濾濾液濃縮、醇沉、沉淀用三氯乙酸法脫蛋白、上清糖液用過(guò)氧化氫法脫色、超濾、濾液干燥后得黑果枸杞粗多糖，粗多糖上DEAE-纖維素柱層析得五種多糖粗品、五種多糖粗品分別上SephadexG-100柱層析、脫鹽、冷凍干燥制備出五種多糖純品(LRGP1、LRGP2、LRGP3、LRGP4和LRGP5)，結(jié)構(gòu)分析表明，LRGP1、LRGP2、LRGP3和LRGP4是結(jié)構(gòu)不同的阿拉伯半乳聚糖，LRGP5是一種鼠李半乳糖醛酸聚糖。

2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的超聲加熱提取工藝條件為提取溫度50～80℃，超聲波頻率20～60KHz，提取時(shí)間1～4h。

3.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的三氯乙酸法脫蛋白條件為三氯乙酸終濃度2～6％，攪拌15～60min后離心，保留上清糖液。

4.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的過(guò)氧化氫法脫色條件為溫度30～60℃、時(shí)間15～60min、用氨水調(diào)體系pH?8～9后脫色、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30％的H₂O₂的體積用量為多糖液體積的2％～10％。

5.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的DEAE-纖維素用0.01～0.10mol/L?NaHCO₃溶液平衡為HCO₃^-型，黑果枸杞粗多糖上樣，依次用蒸餾水、0.02～0.07、0.09～0.15、0.20～0.30、0.40～0.60mol/L?NaHCO₃溶液梯度洗脫，分別后獲得五種多糖粗品LRP1、LRP2、LRP3、LRP4和LRP5。

6.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：五種多糖粗品分別上樣，所述的Sephadex?G-100凝膠色譜柱以0.05～0.20mol/L?NaCl水溶液洗脫，使用Sephadex?G-25柱蒸餾水水洗脫鹽，濃縮冷凍干燥后獲得五種多糖純品LRGP1、LRGP2、LRGP3、LRGP4和LRGP5。

7.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：黑果枸杞果實(shí)加2～8倍體積的水；醇沉過(guò)程加乙醇調(diào)體系乙醇質(zhì)量濃度至75～85％，靜置過(guò)濾得多糖沉淀；將多糖液經(jīng)過(guò)1～3萬(wàn)截流分子量的膜超濾。

8.一種權(quán)利要求1所述方法分離得到的五種多糖，其特征在于：

五種多糖組分理化性質(zhì)如下：

表黑果枸杞多糖的理化性質(zhì)

所述黑果枸杞多糖LRGP1、LRGP2、LRGP3和LRGP4以→6)Gal(1→構(gòu)成主鏈，部分半乳糖C³存在分支，由半乳糖以→3)Gal(1→連接在半乳糖C³位構(gòu)成；支鏈由Ara(1→，→3)Ara(1→，→5)Ara(1→，Glc(1→，→2，4)Rha(1→連接而成；LRGP5主鏈由→4)GalA(1→2)Rha(1→重復(fù)單元構(gòu)成，部分鼠李糖C⁴位存在分支；

LRGP1的重復(fù)單元結(jié)構(gòu)為：

LRGP2的重復(fù)單元結(jié)構(gòu)為：

LRGP3的重復(fù)單元結(jié)構(gòu)為：

LRGP4的重復(fù)單元結(jié)構(gòu)為：

LRGP5的重復(fù)單元結(jié)構(gòu)為：

Rha：鼠李糖；Ara：阿拉伯糖；Xyl：木糖；Man：甘露糖；Glc：葡萄糖；Gal：半乳糖；GalA：半乳糖醛酸。