[發明專利]馬動脈炎病毒的液相芯片檢測引物及檢測方法無效
| 申請號： | 201110426985.0 | 申請日： | 2011-12-19 |
| 公開（公告）號： | CN102424865A | 公開（公告）日： | 2012-04-25 |
| 發明（設計）人： | 鄭小龍;徐彪;梁成珠;王群;朱來華;鄧明俊;岳志芹;肖西志;趙玉然 | 申請（專利權）人： | 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201 | 代理人： | 張中南 |
| 地址： | 266002 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 動脈炎 病毒 芯片 檢測 引物 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種馬動脈炎病毒的液相芯片檢測的引物和探針，其特征在于，引物和探針的核酸序列如下：
正向引物：SEQ?ID?NO：1
反向引物：`SEQ?ID?NO：2
探針：`SEQ?ID?NO：3。
2.如權利要求1所述的引物和探針，其特征在于所述的正向引物和反向引物5’端進行生物素標記；探針的5’端進行氨基化修飾。
3.一種液相芯片檢測馬動脈炎病毒的方法，其特征在于，是用權利要求2所述的引物和探針進行檢測。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于包括有：1)檢測樣品RNA的提取、2)RT-PCR擴增目的片段、3)寡核苷酸探針與微球共價偶聯、4)探針與RT-PCR擴增片段雜交和5)液相芯片儀分析步驟。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述的步驟2)RT-PCR反應的循環條件為：
第一階段，反轉錄50℃：30min；
第二階段，預變性94℃：3min；
第三階段，擴增94℃：30s，59℃：30s，72℃：30s，30個循環；
第四階段，延伸72℃：5min。
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