[發明專利]一種黃素酶親和介質及其合成和應用

有效

• 申請號: 201110425508.2
• 申請日: 2011-12-16
• 公開（公告）號: CN102513065A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 辛瑜;楊海麟;張玲;張玉然;陳亦;仝艷軍
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: B01J20/24
• 分類號: B01J20/24;B01J20/30;B01D15/42;C12N9/04;C12N9/02
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 王潔;顧小偉

1.一種黃素酶親和介質，其特征在于，所述黃素酶親和介質由黃素酶親和配體和層析介質連接而成。

2.根據權利要求1所述的黃素酶親和介質，其特征在于，所述黃素酶親和配體是黃素輔酶核心構件異咯嗪環的結構類似物，所述層析介質是Sepharose、殼聚糖、硅膠或陶瓷顆粒。

3.根據權利要求2所述的黃素酶親和介質，其特征在于，所述的黃素輔酶核心構件異咯嗪環的結構類似物是乳清酸、胞嘧啶、7-氯異咯嗪或8-氯異咯嗪。

4.根據權利要求1所述的黃素酶親和介質，其特征在于，所述黃素酶親和介質由黃素酶親和配體和層析介質通過環氧氯丙烷和乙二胺、1，3-丙二胺、2-羥基-1，3丙二胺或1，4-丁二胺作為間隔臂進行連接。

5.一種根據權利要求1所述的黃素酶親和介質的合成方法，其特征在于，將所述黃素酶親和配體和所述層析介質進行連接得到。

6.一種利用根據權利要求1所述的黃素酶親和介質大規模純化黃素酶的方法，其特征在于，將含有黃素酶的溶液流經所述黃素酶親和介質進行親和吸附，然后采用清洗液沖洗所述黃素酶親和介質，最后用洗脫緩沖液洗脫所述黃素酶親和介質上吸附的黃素酶，從而純化黃素酶。

7.根據權利要求6所述的黃素酶親和介質大規模純化黃素酶的方法，其特征在于，所述黃素酶是膽固醇氧化酶或黃嘌呤氧化酶。

8.根據權利要求6所述的黃素酶親和介質大規模純化黃素酶的方法，其特征在于，所述親和吸附的條件為pH值6.5～7.5，電導率為5-10ms/cm。

9.根據權利要求6所述的黃素酶親和介質大規模純化黃素酶的方法，其特征在于，采用清洗液沖洗所述黃素酶親和介質的清洗條件為pH值6.5～7.5，電導率5～10ms/cm。

10.根據權利要求6所述的黃素酶親和介質大規模純化黃素酶的方法，其特征在于，用洗脫緩沖液洗脫所述黃素酶親和介質上吸附的黃素酶的洗脫條件為pH值2.8。