[發明專利]一種誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法有效
| 申請號: | 201110420715.9 | 申請日: | 2011-12-16 |
| 公開(公告)號: | CN102517322A | 公開(公告)日: | 2012-06-27 |
| 發明(設計)人: | 王英娟;步懷宇 | 申請(專利權)人: | 西北大學 |
| 主分類號: | C12N15/82 | 分類號: | C12N15/82;A01H5/06 |
| 代理公司: | 西安西達專利代理有限責任公司 61202 | 代理人: | 謝鋼 |
| 地址: | 710069 *** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 誘導 毛脈蓼 產生 毛狀根 方法 | ||
1.一種誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于:以毛脈蓼葉片為外植體,通過發根農桿菌株W.T15834對其誘導形成毛狀根,培養得到大量毛脈蓼毛狀根。
2.根據權利要求1所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)選取在MS?固體培養基上繼代培養的毛脈蓼20天齡無菌苗的幼嫩葉片切成1.0?cm2大小的不具葉柄的葉片外植體,置于MS基本培養基上預培養24h;
(2)浸入用MS液體培養基稀釋5倍的發根農桿菌W.T15834菌懸液中震蕩,取出外植體,用無菌濾紙吸去多余菌液并放回原培養基上黑暗共培養5天;
(3)轉入MS篩選培養基上,在25℃、每天14h散射光下培養誘導形成毛狀根;
(4)切取從葉片外植體切口中脈處產生的毛狀根,置于MS篩選培養基上除菌培養,每7天繼代一次獲得無菌毛脈蓼毛狀根;
(5)毛脈蓼毛狀根培養于MS固體或液體培養基上繼代培養。
3.根據權利要求2所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于MS液體培養基組成為:MS?基本培養基,附加30?g/L?蔗糖,pH?為5.8~6.2。
4.根據權利要求2所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于MS?固體培養基組成為:MS?基本培養基,附加30?g/L?蔗糖,7?g/L?瓊脂,pH?為5.8~6.2。
5.根據權利要求4所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于MS篩選培養基組成為:MS?固體培養基,附加300?mg/L頭胞噻肟鈉,pH為5.8~6.2。
6.根據權利要求2所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于:毛脈蓼毛狀根繼代培養時間為4周。
7.根據權利要求2所述的誘導毛脈蓼產生毛狀根的方法,其特征在于:毛脈蓼毛狀根繼代培養于1/2MS液體培養基上。
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