[發明專利]一種卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的制備方法和用途

無效

• 申請號: 201110420070.9
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN102488899A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 焦月;趙鋼;王國新;王智佳;沈麗麗
• 申請（專利權）人: 天津濟命生生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;C07K16/08;A61P31/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的制備方法和用途，其特征是：卵黃免疫球蛋白緩釋制劑采用人型輪狀病毒為免疫原，MA-104細胞為病毒培養宿主細胞，牛型WC3株為病毒生產株，MA-104細胞為病毒培養宿主細胞，通過病毒培養，收獲病毒液，經純化、超濾濃縮獲得雙價病毒液，經滅活后注射到SPF母雞體內，經此免疫后，取雞蛋卵黃經分離提取、純化得到卵黃免疫球蛋白，再加入卵磷脂制成注射液。

2.一種卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的制備方法和用途，如權利要求1所述，其特征是：所用人型輪狀病毒為Wa株和猴型SA11株的二聯體。

3.一種卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的制備方法和用途，如權利要求1所述，其特征是：卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的用途為：可有效替代抗生素預防和治療因耶爾森菌、腸毒性大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌、幽門螺桿菌等感染引起的胃腸道疾病。

4.一種卵黃免疫球蛋白緩釋制劑的制備方法和用途，如權利要求1所述，其特征是：抗輪狀病毒卵黃抗體的制備方法如下步驟：

(1)細胞培養

將MA-104細胞用旋轉培養瓶連續傳代培養，用胰蛋白酶處理細胞，加入病毒液，然后吸去病毒液，以維持液繼續培養，至細胞病變達75％時收獲病毒液；

(2)病毒培養液的純化

病毒培養液反復凍融三次，間斷超聲破碎，離心，上清中加入PEG6000，放置過夜，離心，沉淀用PBS重懸，上樣至Sepharose?GL-4B進行凝膠過濾，收集主峰后超濾濃縮，濃縮液進行免疫學、蛋白濃度和CPE測定；

(3)動物免疫

采用六月齡無特定病原體(SPF)產蛋母雞注射滅活雙價病毒液+不完全福氏佐劑，待卵黃免疫球蛋白中和效價達400單位/ml后收集雞蛋進行卵黃免疫球蛋白提取；

(4)免疫雞蛋的處理

免疫雞蛋表面無菌處理，去蛋清后勻化處理，勻化后靜置過夜；

(5)免疫球蛋白純化

上清加入飽和硫酸銨梯度沉淀，靜置，離心，沉淀用PBS重懸，經Sepharose?4FF柱層析凝膠過濾純化，收集免疫球蛋白峰經超濾脫鹽濃縮；

(6)制劑制備

加入卵磷脂制成注射液。