[發(fā)明專利]一種通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110418620.3 | 申請日： | 2011-12-15 |
| 公開（公告）號： | CN102559746A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 郎明林;王維;楊學舉;劉桂茹;溫樹敏;張貴友 | 申請（專利權）人： | 河北農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N15/84 | 分類號： | C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京法思騰知識產(chǎn)權代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇;楊小蓉 |
| 地址： | 071001 *** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 通過 桿菌 浸染 獲得 轉(zhuǎn)基因 小麥 方法 | ||
1.一種通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)培養(yǎng)包含載有目的基因的表達載體的農(nóng)桿菌菌株，用浸染培養(yǎng)基懸浮菌體；
2)選取抽穗期小麥進行轉(zhuǎn)化，去掉幼穗頂端和末端未發(fā)育好的小穗，剪去小麥小穗頂端1/3，將小麥幼穗浸入含農(nóng)桿菌的浸染培養(yǎng)基中。
2.根據(jù)權利要求1所述通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，所述農(nóng)桿菌菌株為EHA105或GV3101。
3.根據(jù)權利要求1所述通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，所述表達載體為pBI121。
4.根據(jù)權利要求1所述通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，所述小麥為冬小麥品種冀麥38或周麥16。
5.根據(jù)權利要求1所述通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，所述浸染培養(yǎng)基為以MS為基本培養(yǎng)基，添加MES緩沖液0.5mM，乙酰丁香酮200μM和表面活性劑Silwet?L-77?0.04％～0.06％，pH5.8～6.0。
6.根據(jù)權利要求1所述通過農(nóng)桿菌浸染幼穗獲得轉(zhuǎn)基因小麥的方法，其特征在于，所述抽穗期小麥為小麥生長錐已部分露出且尚未完全從鞘中抽出時的小麥幼穗。
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