[發(fā)明專利]一種大腸埃希氏菌RB3菌株及用它液態(tài)發(fā)酵制備乙酰酯酶的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110413232.6
• 申請日: 2011-12-10
• 公開（公告）號: CN102719370A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳玉香;佟金;邢巖;梁彥龍;趙壽經(jīng);周皓芹
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/18;C12R1/19
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責(zé)任公司 22201
• 代理人: 朱世林;王壽珍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及大腸埃希氏菌屬的一株新菌株及用它液態(tài)發(fā)酵制備乙酰酯酶的方法。?

背景技術(shù)

半纖維素的徹底降解與木質(zhì)纖維素資源轉(zhuǎn)化與利用密切相關(guān)。半纖維素是僅次于纖維素的第二大植物多糖，由木糖、阿拉伯糖等單元構(gòu)成的不均一多糖。在大多數(shù)植物細(xì)胞壁中，半纖維素以木聚糖為骨架，木糖殘基的C-2或者C-3均有不同程度乙酰化，乙酰基的存在使木聚糖酶水解作用受到阻礙。半纖維素降解涉及到多種酶的協(xié)同作用，例如，β-內(nèi)切木聚糖酶、β-木糖苷酶、乙酰酯酶等。乙酰酯酶(acetylesterase，EC?3.1.1.6)在半纖維素降解過程，水解木糖殘基的乙酰酯鍵，將半纖維素的部分側(cè)鏈水解去除，減小木聚糖主鏈降解時酶作用的空間位阻效應(yīng)。在木質(zhì)纖維素糖化過程中，乙酰酯酶與其他半纖維素酶具有協(xié)同作用，優(yōu)化乙酰酯酶和木聚糖酶的協(xié)同作用，可以提高糖化效率。乙酰酯酶在木質(zhì)纖維素的生物降解、造紙制漿、反芻動物粗飼料加工等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。根據(jù)文獻報道，產(chǎn)乙酰酯酶的微生物主要有：Penicillium?notatum^[1]、Neocallimastix?frontalis^[2]、Trichoderma?reesei，Aspergillus?awamori、A.niger、A.oryzae、Schizophyllum?commune、Fibrobacter?succinogenes?^[3]，大多數(shù)為真菌，只有少數(shù)為細(xì)菌。目前關(guān)于半纖維素酶系的研究集中于降解半纖維素主鏈的木聚糖酶和β-1，4木糖苷酶，而對降解側(cè)鏈的酶例如乙酰酯酶研究較少。目前生產(chǎn)乙酰酯酶的方法主要是采用液態(tài)發(fā)酵的方式，但是由于選用菌種不同，所產(chǎn)乙酰酯酶的活力均不同，乙酰酯酶活力低是普遍問題。曹陽春等人報道瘤胃厭氧真菌Neocallimastix?frontalis所產(chǎn)乙酰酯酶活力最高為0.165U/mL^[2]。Yue?et?al.報道瘤胃厭氧真菌Neocallimastix?sp.YQ2所產(chǎn)乙酰酯酶最高酶活力達到0.018U/mL^[4]。以玉米芯粉為液態(tài)發(fā)酵碳源，Candida?guilliermondii所產(chǎn)乙酰酯酶活力最高達到0.28U/mL左右^[3]。以樺木木聚糖或者玉米苞葉粉為碳源液態(tài)發(fā)酵，Streptomyces?sp.PC22所產(chǎn)乙酰酯酶活力最高達到0.3U/mL^[5]。液態(tài)發(fā)酵添加玉米芯粉，Bacillus?pumilus所產(chǎn)乙酰酯酶活力最高達到0.11U/mL左右^[6]。因此，開發(fā)一種適合工業(yè)性批量生產(chǎn)具有較高酶活力的乙酰酯酶的方法，具有顯著的實際應(yīng)用價值。?

參考文獻：?

[1]Atta?S，Ali?S，Akhtar?MN，et?al.Determination?of?some?significant?batch?culture?conditions?affecting?acetyl-xylan?esterase?production?by?Penicillium?notatum?NRRL-1249.BMC??Biotechnology，2011，11：52.?

[2]曹陽春，楊紅建，沈博通.高產(chǎn)纖維降解酶牦牛瘤胃厭氧真菌分離株的篩選與鑒定.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，15(3)：70-74.?

[3]Basaran?P，Hang?YD.Purification?and?characterization?of?acetyl?esterase?from?Candida?guilliermondii.Letters?in?Applied?Microbiology，2000，30：167-171.?

[4]Yue?Q，Yang?HJ，Cao?YC，et?al.Feruloyl?and?acetyl?esterase?production?of?an?anaerobic?rumen?fungus?Neocallimastix?sp.YQ2?effected?by?glucose?and?soluble?nitrogen?supplementations?and?its?potential?in?the?hydrolysis?of?fibrous?feedstuffs.Animal?Feed?Science?and?Technology，2009，153：263-277.?