[發(fā)明專利]一種大腸埃希氏菌RB3菌株及用它液態(tài)發(fā)酵制備乙酰酯酶的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110413232.6
• 申請日: 2011-12-10
• 公開（公告）號: CN102719370A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳玉香;佟金;邢巖;梁彥龍;趙壽經(jīng);周皓芹
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/18;C12R1/19
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責(zé)任公司 22201
• 代理人: 朱世林;王壽珍

1.一種大腸埃希氏菌RB3CGMCC?No.5252菌株，它具有在厭氧條件下發(fā)酵制備酶活力較高的乙酰酯酶的特征。

2.一種液態(tài)發(fā)酵制備乙酰酯酶的方法，其特征在于：將權(quán)利要求1所述的大腸埃希氏菌RB3?CGMCC?No.5252菌株，接種在以玉米秸稈粉為碳源、pH值為8.0的液態(tài)培養(yǎng)基中，在40℃、厭氧條件下發(fā)酵4d，發(fā)酵產(chǎn)物離心，上清液即為乙酰酯酶粗酶液；

所述的液態(tài)培養(yǎng)基構(gòu)成如下：玉米秸稈粉10g，無細胞瘤胃液170mL，緩沖液A?165mL，緩沖液B?165mL，蛋白胨1.0g，酵母浸出膏1.0g，L-半胱氨酸鹽酸鹽1.5g，蒸餾水定容至1000mL；1×10⁵Pa滅菌30min；

所述的緩沖液A：KH₂PO₄?3g、(NH₄)₂SO₄?3g、NaCl?6g、CaCl₂·2H₂O?0.4g、MgSO₄·7H₂O0.6g，蒸餾水定容至1000mL；

所述的緩沖液B：K₂HPO₄·3H₂O?4g，蒸餾水定容至1000mL；

所述的無細胞瘤胃液的制備：將新鮮瘤胃液8000g離心10min所得到的上清液。