[發明專利]畢赤酵母制備人白細胞介素29成熟肽的方法

無效

• 申請號: 201110413183.6
• 申請日: 2011-12-13
• 公開（公告）號: CN102533840A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 陳偉;鄭海軍;于明磊;郁心;鄔敏辰;吳靜
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N1/19;C12N15/23;C12P21/02;C07K14/57;C07K1/18;C07K1/16;C12R1/84
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1.一種人白細胞介素29(hIL-29)成熟肽的重組真核表達載體，其特征在于，所述的重組真核表達載體中插入了hIL-29成熟肽的編碼基因。

2.如權利要求1所述的重組真核表達載體中的hIL-29成熟肽的編碼基因，其DNA的核苷酸序列對應于序列表中的SEQ?ID?NO：1。

3.如權利要求1所述的重組真核表達載體中的hIL-29成熟肽的編碼基因，其編碼產物的氨基酸序列對應于序列表中的SEQ?ID?NO：2。

4.一種重組畢赤酵母工程菌，其特征在于，所述的重組畢赤酵母的染色體中整合有權利要求1所述的hIL-29成熟肽的編碼基因，并且分泌表達hIL-29成熟肽至培養液中。

5.一種制備人白細胞介素29成熟肽的方法，其特征在于，包括步驟：

(1)用適當的培養液，培養權利要求4所述的重組畢赤酵母工程菌；

(2)在培養液中添加適當的誘導劑，誘導重組畢赤酵母工程菌分泌表達hIL-29成熟肽；

(3)從培養液中分離純化出重組畢赤酵母分泌表達的hIL-29成熟肽。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)所用的培養液為BMGY培養液和BMMY培養液；步驟(2)所用的誘導劑為甲醇，添加甲醇的終濃度為培養液體積的0.5～1％；步驟(3)所用的分離純化hIL-29成熟肽的方法為先用強陽離子型離子交換層析分離培養液中的hIL-29成熟肽，再用凝膠過濾層析得到純化的hIL-29成熟肽。