[發(fā)明專利]篩選和/或分析目標(biāo)配體的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110412780.7
• 申請日: 2011-12-12
• 公開（公告）號: CN103163205A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 水雯箐;饒子和;李偉;郭宇;楊誠
• 申請（專利權(quán)）人: 天津市國際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院;南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 北京德恒律師事務(wù)所 11306
• 代理人: 陸鑫;房嶺梅

1.一種篩選和/或分析目標(biāo)配體的方法，包括如下步驟：

a.制備受試品與目標(biāo)靶點(diǎn)的復(fù)合物；

b.利用質(zhì)譜分析上述復(fù)合物是否制備成功。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，當(dāng)步驟b的分析結(jié)果為復(fù)合物制備成功時(shí)，所述方法還包括：c.進(jìn)一步分析復(fù)合物中受試品與目標(biāo)靶點(diǎn)結(jié)合的配比數(shù)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟b通過以下方式實(shí)施：通過質(zhì)譜精確測量的結(jié)果判斷是否存在目標(biāo)靶點(diǎn)與受試品形成的復(fù)合物的整體分子量，從而判斷復(fù)合物是否制備成功。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中步驟c通過以下方式實(shí)施：將目標(biāo)靶點(diǎn)與受試品形成的復(fù)合物的整體分子量，減去目標(biāo)靶點(diǎn)的分子量，獲得的差值與受試品的分子量進(jìn)行比較，通過兩者之間的倍數(shù)關(guān)系來分析受試品與目標(biāo)靶點(diǎn)結(jié)合的配比數(shù)。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中在c步驟之后，還包括：d.利用滴定實(shí)驗(yàn)測量反映目標(biāo)靶點(diǎn)與目標(biāo)配體之間的結(jié)合強(qiáng)度的解離常數(shù)值的步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述目標(biāo)配體是與目標(biāo)靶點(diǎn)形成復(fù)合物的受試品。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述受試品是利用高通量酶活性測試系統(tǒng)篩選獲得的所述目標(biāo)靶點(diǎn)的候選抑制劑。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述候選抑制劑是單一的成分，或者是包含多組分的混合物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述包含多組分的混合物是天然產(chǎn)物的提取物。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在制備受試品與目標(biāo)靶點(diǎn)的復(fù)合物的步驟之前還包括通過離心式濃縮管、微透析或者微型色譜柱純化目標(biāo)靶點(diǎn)的步驟。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中制備受試品與目標(biāo)靶點(diǎn)的復(fù)合物的步驟通過將所述目標(biāo)靶點(diǎn)與受試品一起浸泡實(shí)施。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟b的質(zhì)譜分析通過高分辨的電噴霧離子化質(zhì)譜(ESI-MS)實(shí)施。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中步驟b的質(zhì)譜分析包括打開離子源內(nèi)的隔離閥來調(diào)整質(zhì)譜儀的前級壓力，使其在4-6mbar的范圍內(nèi)變動。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述目標(biāo)靶點(diǎn)是病毒合成的蛋白酶，或者是核酸內(nèi)切酶。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述病毒合成的蛋白酶是HIV蛋白酶或SARS冠狀病毒主蛋白酶。