[發(fā)明專利]兩種菌協(xié)同降解多環(huán)芳烴的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110411724.1
• 申請日: 2011-12-12
• 公開（公告）號(hào): CN102491533A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李盼盼;臧淑艷;葉小貝;袁博;侯雪敏;尹利
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽化工大學(xué)
• 主分類號(hào): C02F3/34
• 分類號(hào): C02F3/34;C12N1/20;C02F101/32
• 代理公司: 沈陽技聯(lián)專利代理有限公司 21205
• 代理人: 張志剛

1.兩種菌協(xié)同降解多環(huán)芳烴的方法，其特征在于，該方法包括如下過程：

a.菌類的培養(yǎng)：包括菌種的分離、鑒定和菌種的培養(yǎng)，其菌種的培養(yǎng)為：?

細(xì)菌培養(yǎng)基Ⅰ：?牛肉膏?5?g，蛋白胨?5?g，葡萄糖?5?g，去離子水?1L，pH?7.2；?如果灌制斜面，則加入?2%瓊脂；

細(xì)菌培養(yǎng)基Ⅱ：MgSO₄·7H₂O?0.2?g，CaCl₂·2H₂O?0.01?g，F(xiàn)e?SO₄·7H₂O?0.01?g，KH₂PO₄????0.4?g，Na₂HPO₄·12H₂O????0.6?g?，MnSO₄·H₂O?????0.02?g,?NH₄NO₃?1?g，葡萄糖?0.5?g，去離子水?1L,?pH?7.0～7.6；

真菌培養(yǎng)基Ⅰ：把馬鈴薯洗凈去皮，取?200?克切成小塊，加水?1000?毫升，?煮沸半小時(shí)后，用紗布過濾，補(bǔ)足水分；在濾液中加入蔗?糖?20?克補(bǔ)足水分至?1000?毫升，分裝，滅菌，備用；如果?灌制斜面，則加入?2%瓊脂；PH?自然；

真菌培養(yǎng)基Ⅱ：(g/L):?NH₄NO₃,?1;?MgSO₄·7H₂O,?0.2;?CaCl₂·2H₂O,?0.01;?FeSO₄·7H₂O,?0.01;?KH₂PO₄,?0.4;?Na₂HPO₄·12H₂O,?0.6;?MnSO₄·H2O,?0.02;?葡萄糖,?0.5；

在?150ml三角瓶中加入?30ml培養(yǎng)液，在壓力為?1.01325×10⁵?Pa滅菌?30?min，?冷卻至室溫后，將保存于斜面的不同菌種分別接至上述細(xì)菌培養(yǎng)基Ⅰ和真菌培養(yǎng)?基Ⅰ，培養(yǎng)?12-20h后，在無菌室分別對應(yīng)地轉(zhuǎn)接到細(xì)菌培養(yǎng)基Ⅱ樣品中和真菌培?養(yǎng)基Ⅱ樣品中；

再將PAHs與菌種混合培養(yǎng)：對降解菌制備完成之后在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前將降解的多環(huán)芳烴和菌類混合4周時(shí)間，增加菌對這種多環(huán)芳烴毒性的耐受度；

b.?降解實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)設(shè)置三個(gè)方案，目的是做一比較來驗(yàn)證結(jié)果的正確性，

方案一：將要降解某一個(gè)多環(huán)芳烴作為唯一的碳源，加入培養(yǎng)好的真菌，調(diào)節(jié)適度的pH值，入搖床適宜條件下降解培養(yǎng)，在0,?2,?4,?6,?8,?10d?分別取樣；

方案二：將要降解某一個(gè)多環(huán)芳烴作為唯一的碳源，加入培養(yǎng)好的細(xì)菌，調(diào)節(jié)pH值，入搖床降解培養(yǎng)，在0,?2,?4,?6,?8,?10d?分別取樣；

方案三：除了加入的是50%真菌和50%的細(xì)菌混合菌外，其他處理方法同上；

c.?結(jié)果處理：對上述的樣品首先二氯甲烷萃取處理，紫外分光光度計(jì)進(jìn)行測定。