[發明專利]萱草花及其制劑的檢測方法

有效

• 申請號: 201110410836.5
• 申請日: 2011-12-12
• 公開（公告）號: CN102495168A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 倪健;鄒憶懷;朱陵群
• 申請（專利權）人: 倪健
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/90;G01N21/33
• 代理公司: 北京市浩天知識產權代理事務所 11276
• 代理人: 雒純丹

技術領域

本發明涉及一種中藥及其制劑的檢測方法，特別涉及萱草花及其制劑的檢測方法。

背景技術

萱草花，即萱草花(Hemerocallis?citrina?Baroni)，又名“金針菜”、“一日百合”，俗稱“忘憂草”，屬百合科萱草屬多年生草本植物植物，在我國各地多有種植，其具有豐富的營養成份，主要化學成分有蛋白質、脂肪、碳水化合物，還有多種維生素、生物堿、苷、黃酮類、胡蘿卜素、揮發油、鞣質以及無機礦物鈣、磷，以黃酮類化合物為主要成分，可以藥食兩用，明代李時珍在《本草綱目》中稱其有安神醒腦、增智寬胸、美容養血、解熱消毒、除煩通乳之功效。

現代研究萱草花具有補腦健智、化瘀止血、通絡止痛、抗菌消炎等功效，它具有增強免疫力、活血化瘀、保肝抗炎、抗菌抗病毒、抑制腫瘤、清除氧自由基和抑菌作用等多種功能。近年來有研究表明萱草花有明顯的抗抑郁作用，萱草花提取制成的制劑能有效的治療抑郁癥，但目前對萱草花制劑的質量檢測研究尚少，這會影響產品的質量和療效，不利于藥品的標準化生產及提高生產效率，也不符合現代中藥發展的趨勢。

發明內容

本發明的目的在于公開了萱草花的檢測方法。

本發明另一個目的在于公開萱草花制劑的檢測方法。

本發明目的是通過如下技術方案實現的：

萱草花制劑的檢測方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種：

A、薄層色譜鑒別

取萱草花制劑，用10-50％乙醇溶解，離心取上清液，作為供試品溶液；

取蘆丁標準品，加甲醇制成1mg/ml溶液，作為蘆丁對照品溶液；

吸取等量供試品及對照品溶液，分別點于同一聚酰胺板上，以1-5∶1-5的甲醇∶水為展開劑，展開，取出，噴0.5％-2％三氯化鋁展開劑顯色，置300-400nm紫外光燈下檢視；

優選的，用10-50％乙醇超聲溶解；

優選的，置365nm紫外光燈下檢視；

B、紫外分光光度法含量測定

供試品溶液的制備：萱草花制劑加10-50％乙醇提取；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品，加甲醇制成每1mL含0.1-0.4mg的溶液；

標準曲線的制備：分別量取不同容量的對照品溶液，分別置容器中，各容器中先后相同加入3％-8％亞硝酸鈉溶液、4％-15％硝酸鋁溶液、氫氧化鈉試液；在波長400～600nm內選擇波長，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程；

取供試品溶液，置量瓶中，先后相同加入3％-8％亞硝酸鈉溶液、4％-15％硝酸鋁溶液、氫氧化鈉試液；按標準曲線選取的紫外波長測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含蘆丁的濃度，計算，即得；

供試品溶液的制備優選用10-50％乙醇超聲提取；

對照品溶液的制備優選：制成每1mL含0.2mg的溶液；

所述亞硝酸鈉溶液的濃度優選為：5％；

所述酸鋁溶液的濃度優選為：10％；

C、HPLC法含量測定

測定條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以30-50∶50-70的甲醇∶0.5％冰醋酸溶液為流動相；檢測波長為200-300nm，理論塔板數按蘆丁峰計算應不低于3000；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品，加甲醇制成對照品溶液；

供試品溶液的制備：稱取萱草花制劑加10-50％乙醇提取5-20分鐘，過濾，取濾液，即得；

測定法：分別吸取相同體積的對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，既得；

供試品溶液的制備方法中，優選乙醇超聲提取；

D、原藥材的HPLC指紋圖譜

測定條件：C18色譜柱，流動相為甲醇-水(0.5％冰醋酸)梯度洗脫，梯度洗脫的條件為：第0-20min：甲醇為20％，0.5％的冰醋酸水溶液為80％；第20-30min：甲醇為30％，0.5％的冰醋酸水溶液為70％；第30-70min：甲醇為30％，0.5％的冰醋酸水溶液為70％；第70min至最后：甲醇為80％，0.5％的冰醋酸水溶液為20％；流速0.5-1.5mL/min^-1，檢測波長200-300nm，柱溫20-30℃；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品加甲醇制成對照品溶液；

供試品溶液的制備：稱取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超聲處理20-45分鐘，靜置放冷，取上清液，微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；

按上述方法色譜條件測定，記錄指紋圖譜；