[發(fā)明專利]萱草花及其制劑的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110410836.5
• 申請日: 2011-12-12
• 公開（公告）號(hào): CN102495168A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 倪健;鄒憶懷;朱陵群
• 申請（專利權(quán)）人: 倪健
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/90;G01N21/33
• 代理公司: 北京市浩天知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 11276
• 代理人: 雒純丹

1.萱草花制劑的檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定方法：

測定條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以30-50∶50-70的甲醇∶0.5％冰醋酸溶液為流動(dòng)相；檢測波長為254nm，理論塔板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；

對照品溶液的制備：取蘆丁對照品，加甲醇制成對照品溶液；

供試品溶液的制備：取萱草花制劑加10-50％乙醇超聲5-20分鐘，過濾，取濾液，即得；

測定法：分別吸取相同體積的對照品與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于該方法還包括如下方法中的一種或幾種：

A、薄層色譜鑒別

取萱草花制劑，用10-50％乙醇溶解，離心取上清液，作為供試品溶液；

取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，加甲醇制成1mg/ml溶液，作為蘆丁對照品溶液；

吸取等量供試品及對照品溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺板上，以1-5∶1-5的甲醇∶水為展開劑，展開，取出，噴0.5％-2％三氯化鋁展開劑顯色，置300-400nm紫外光燈下檢視；

B、紫外分光光度法含量測定

供試品溶液的制備：萱草花制劑加10-50％乙醇提取；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品，加甲醇制成每1mL含0.1-0.4mg的溶液；

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別量取不同容量的對照品溶液，分別置容器中，各容器中先后相同加入3％-8％亞硝酸鈉溶液、4％-15％硝酸鋁溶液、氫氧化鈉試液；在波長400～600nm內(nèi)選擇波長，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程；

取供試品溶液，置量瓶中，先后相同加入3％-8％亞硝酸鈉溶液、4％-15％硝酸鋁溶液、氫氧化鈉試液；按標(biāo)準(zhǔn)曲線選取的紫外波長測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含蘆丁的濃度，計(jì)算，即得；

C、HPLC法含量測定

測定條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以30-50∶50-70的甲醇∶0.5％冰醋酸溶液為流動(dòng)相；檢測波長為200-300nm，理論塔板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品，加甲醇制成對照品溶液；

供試品溶液的制備：稱取萱草花制劑加10-50％乙醇提取5-20分鐘，過濾，取濾液，即得；

測定法：分別吸取相同體積的對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定。

3.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于該方法中，

流動(dòng)相為：甲醇∶0.5％冰醋酸溶液＝40∶60；對照品溶液由蘆丁加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液。

4.如權(quán)利要求2所述的檢測方法，其特征在于該方法中對原藥材的HPLC指紋圖譜檢測方法中：流速1mL/min-1，檢測波長254nm，柱溫25℃。

5.如權(quán)利要求1-4任一所述的檢測方法，其特征在于該方法中所述萱草花制劑為：萱草花單味藥提取后，所得提取物按常規(guī)的制劑工藝制成臨床可接受的任意劑型。

6.萱草花的HPLC指紋圖譜檢測方法，其特征在于該方法為：

色譜條件：C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5％冰醋酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為：第0-20min：甲醇為20％，0.5％的冰醋酸水溶液為80％；第20-30min：甲醇為30％，0.5％的冰醋酸水溶液為70％；第30-70min：甲醇為30％，0.5％的冰醋酸水溶液為70％；第70min至最后：甲醇為80％，0.5％的冰醋酸水溶液為20％，流速0.5-1.5mL/min^-1，檢測波長200-300nm，柱溫20-30℃；

對照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品加甲醇制成對照品溶液；

供試品溶液的制備：稱取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超聲處理20-45分鐘，靜置放冷，取上清液，微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；

按上述方法色譜條件測定，記錄指紋圖譜。