[發明專利]一種鑒別煙草品種的SCAR標記引物及其方法

無效

• 申請號: 201110408448.3
• 申請日: 2011-12-09
• 公開（公告）號: CN102605047A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 馬林;王紹坤;常壽榮;羅華元;王超;饒智;羅昭標;董石飛;胡戰軍;林昆;毛華
• 申請（專利權）人: 鄭州輕工業學院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 張紹琳

技術領域

本發明涉及一種SCAR標記鑒別煙草品種的方法。屬于煙草生物技術領域。

背景技術

工商分離后，云南烤煙的大量調出及烤煙品種的單一、老化，使云產卷煙原有的原料優勢正逐漸消失，造成云產卷煙品牌與省外品牌在產品風格上出現同質化，使原料成為嚴重制約云產卷煙發展的瓶頸之一。紅云紅河集團原料差異化項目的實施，從新品種選育和國外品種引進兩方面同時著手，一定程度上改善了這種狀況。但是，由于不同煙葉品種在卷煙配方中所起作用不同，隨之而來對于煙葉品種間的鑒別問題亟待解決。到目前為止，對于品種間差異性的鑒定僅限于根據煙葉外觀質量進行評價，尤其在煙葉生產、收購、復烤、倉儲過程中，沒有形成一套科學的跟蹤監測體系，導致一系列的品種混雜、錯標等現象，嚴重影響云產卷煙產品質量和風格的穩定。

SCAR(Sequence-characterized?Amplified?Regions)，即序列特異性擴增區標記，由RAPD(Random?Amplified?Polymorphic?DNA)等分子標記轉化而來，是一種擴增穩定、結果重復性好、操作簡便、應用廣泛的分子標記，SCAR標記能從DNA水平上反映物種之間遺傳差異。采用SCAR標記對不同煙草品種基因組DNA進行分析，建立煙草品種DNA指紋圖譜，可以快速、準確地從煙草DNA水平上對煙草品種進行鑒定。

由于卷煙風格與煙葉品種有直接關系，對煙葉品種的要求越來越高。因此，為了防止由于煙葉品種不符而造成卷煙風格的變化，建立煙草品種的SCAR標記技術是十分必要的。本項目研究擬從RAPD轉化為SCAR標記，建立煙草品種的SCAR標記技術和紅云紅河常用煙草品種SCAR指紋圖譜庫，嚴格控制煙葉品種的準確性，不斷彰顯和強化集團在原料方面的品種特色和競爭優勢。對集團品牌的強勢擴張、產品結構的全面提升優化，具有十分重要的現實意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種SCAR標記鑒別紅云紅河集團12個常用煙草品種的方法。

本發明采用的技術方案是：一種鑒別煙草品種的SCAR標記引物，采用RAPD對12個煙草品種進行分析，得到6條特異片段，基于6條特異片段核苷酸序列設計6對SCAR引物，所述12個煙草品種為紅花大金元、K326、NC102、NC297、云煙85、云煙87、云煙97、中煙100、翠碧1號、KRK26、龍江911和南江3號，所述6對SCAR引物分別為：

S1-F：GTCCACACGGGGCAATTAATG/

S1-R：GTCCACACGGCTATGAGATTA，PCR產物大小為545bp；

S2-F：CACGGCTGCGTGTTATGAAC/

S2-R：CACGGCTGCGAAGAGCTAAG，PCR產物大小為733bp；

S3-F：CAATCGCCGTAAATACACAAAGTA/

S3-R：AATCGCCGTCAGGAGAGAGA，PCR產物大小為887bp；

S4-F：CCACAGCAGTAACAGCAGGA/

S4-R：CCACAGCAGTCTGATATTGGATG，PCR產物大小為313bp；

S5-F：AGGCTGTGCTATTGTAGGATGAGAC/

S5-R：AGGCTGTGCTTACTGCTTCTAC，PCR產物大小為555bp；

S6-F：TTTGAGAATACGTCTTAACGACCA/

S6-R：CCACAGCAGTCCCTTCCTAA，PCR產物大小為1760bp。