[發(fā)明專利]圖案編碼懸浮陣列芯片的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110408013.9
• 申請日: 2011-12-09
• 公開（公告）號: CN102520171A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張繼中
• 申請（專利權(quán)）人: 東南大學(xué)
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及圖案編碼懸浮陣列芯片的檢測方法，尤其是在圖案編碼微載體與待測樣品作用且檢測信號可以獲取的情況下，首先將圖案編碼微載體在微坑陣列基底上固定，然后在成像設(shè)備下解碼及光學(xué)信號讀取。該方法不僅可以解決常規(guī)的圖案編碼微載體通過流式細(xì)胞術(shù)檢測時微載體不能在片檢測及檢測通量有限的問題，而且能夠解決微載體在溶液中由于運動而難以聚焦并獲取信號的問題。因此可望推進圖案編碼懸浮陣列芯片的發(fā)展及應(yīng)用。

背景技術(shù)

懸浮陣列芯片技術(shù)也稱微載體技術(shù)，它是一種通過編碼微顆粒上固定的傳感敏感材料與待測樣品間特異性相互作用而在流體中進行多目標(biāo)檢測分析的工具。它不僅具有通常多目標(biāo)檢測分析技術(shù)所具備的信息量大、檢測時間短、所需檢測樣品體積小以及檢測成本相對傳統(tǒng)檢測方法低的特點，而且無論是制備還是使用它均較另外一種多目標(biāo)檢測分析技術(shù)-平面微陣列芯片技術(shù)有著許多突出的優(yōu)勢：更大的產(chǎn)量、更靈活的檢測目標(biāo)安排、更快速的反應(yīng)以及更高質(zhì)量的實驗結(jié)果。因此，懸浮陣列芯片的研發(fā)正越來越受到了人們的高度關(guān)注并逐漸在藥物篩選、醫(yī)療衛(wèi)生、食品安全、反恐等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

在懸浮陣列芯片中圖案編碼微載體由于圖案易于識別且編碼量大而獲得人們的廣泛關(guān)注。但是目前的圖案編碼微載體懸浮陣列芯片均通過流式細(xì)胞術(shù)進行檢測，這樣不僅不能在片檢測（即檢測前及檢測后微載體均在檢測基底上），而且其檢測通量也受到很大程度的限制。而人們之所以采用流式細(xì)胞術(shù)進行檢測的原因就在于當(dāng)微載體在溶液中運動狀態(tài)下難以聚焦以獲取信號，并且在檢測過程中由于遮擋等問題而易于相互干擾。而通過流式細(xì)胞術(shù)對圖案編碼微載體進行檢測也受到運動中圖案識別存在困難的狀況,因此雖然圖案編碼微載體有著包括編碼量大等眾多優(yōu)點，但是目前實際應(yīng)用的懸浮陣列芯片仍然是以編碼數(shù)量少的光學(xué)編碼為主。這既限制了懸浮陣列芯片的應(yīng)用范圍同時也影響了懸浮陣列芯片的推廣應(yīng)用。因此開發(fā)能夠?qū)D案編碼微載體進行有效識別的檢測技術(shù)就成為一件很有意義的工作。為此本申請首次提出在為圖案編碼微載體構(gòu)筑固定用微坑陣列并進行固定的基礎(chǔ)上通過成像技術(shù)對圖案編碼微載體進行檢測的方法。該技術(shù)不僅能夠在片清晰讀取圖案編碼微載體的編碼，而且成像技術(shù)所具備的廉價、高通量也使得圖案編碼微載體懸浮陣列芯片在與平面微陣列芯片及其它編碼懸浮陣列芯片的對比中有了更多的優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題：本發(fā)明的目的是提供一種適合圖案編碼微載體懸浮陣列芯片的檢測方法，特別是在為圖案編碼微載體在檢測基底上構(gòu)筑固定用微坑陣列的情況下將需要檢測的圖案編碼微載體在微坑陣列上固定，然后通過成像技術(shù)對需要檢測的圖案編碼微載體陣列成像以進行檢測。

技術(shù)方案：為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種圖案編碼懸浮陣列芯片的檢測方法，該方法包括如下步驟：

a、在檢測基底上構(gòu)筑能夠固定圖案編碼微載體的微坑陣列；?

b、將需要檢測的圖案編碼微載體以一個微坑固定一個圖案編碼微載體的方式固定在檢測基底上的微坑陣列中；?

c、通過成像技術(shù)對在檢測基底上微坑陣列中形成的圖案編碼微載體陣列成像以進行檢測。?

優(yōu)選的，檢測基底上的微坑陣列是根據(jù)微載體形狀通過刻蝕技術(shù)或者模板復(fù)制技術(shù)制作的微坑陣列。?

優(yōu)選的，所述將需要檢測的圖案編碼微載體以一個微坑固定一個圖案編碼微載體方式固定在微坑陣列中是指通過作用力將圖案編碼微載體固定至微坑陣列中。?

優(yōu)選的，所述成像技術(shù)是指采用包括光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、紅外顯微鏡、拉曼顯微鏡、掃描儀、照相機在內(nèi)的成像設(shè)備對圖案編碼微載體陣列進行成像。

優(yōu)選的，所述需要檢測的圖案編碼微載體是指固定有傳感敏感材料的圖案編碼微載體完成包括與待測樣品的作用在內(nèi)的信號提取前的所有步驟進行信號提取的圖案編碼微載體。

有益效果：本發(fā)明首次將圖案編碼微載體先固定至檢測基底上微坑陣列中然后通過成像技術(shù)進行圖案編碼微載體的檢測不僅解決了圖案編碼微載體在溶液中難以聚焦、易于互相干擾的問題，而且可以在片高通量、清晰且廉價地獲取檢測信息，因此為圖案編碼微載體懸浮陣列芯片的實際應(yīng)用提供了可能。

附圖說明

圖1是圖案編碼懸浮陣列芯片檢測方法示意圖；

其中?a?含微坑陣列的檢測基底；b?圖案編碼微載體；c?熒光標(biāo)記復(fù)合物；

圖2是微坑陣列俯視圖；

圖3a是一種點編碼模板；

圖3b是另外一種點編碼模板；

圖3c是第三種點編碼模板；其中