[發(fā)明專利]變異葡萄糖脫氫酶

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110404251.2
• 申請(qǐng)日: 2011-10-27
• 公開（公告）號(hào): CN102453702A
• 公開（公告）日: 2012-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 早出廣司;小島勝博
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 愛科來株式會(huì)社;生物工程實(shí)驗(yàn)室有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N9/04
• 分類號(hào): C12N9/04;C12N15/53;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12Q1/54;C12Q1/32;C12Q1/02
• 代理公司: 北京東方億思知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11258
• 代理人: 李劍

1.變異葡萄糖脫氫酶，其具有和序列號(hào)3有至少80％的同一性的氨基酸序列，并且具有葡萄糖脫氫酶活性，其特征在于：

所述氨基酸序列的相應(yīng)于326位、365位及472位的氨基酸殘基分別被谷氨酰胺、酪氨酸及酪氨酸取代；

對(duì)葡萄糖的底物特異性提高，對(duì)二糖類的反應(yīng)性降低。

2.如權(quán)利要求1所述的變異葡萄糖脫氫酶，其具有和序列號(hào)3有至少90％的同一性的氨基酸序列。

3.如權(quán)利要求1或2所述的變異葡萄糖脫氫酶，其中，相應(yīng)于326位、365位及472位的位置以外具有序列號(hào)3所示的氨基酸序列。

4.如權(quán)利要求1或2所述的變異葡萄糖脫氫酶，其中，相應(yīng)于326位、365位及472位的位置以外具有序列號(hào)7所示的氨基酸序列。

5.如權(quán)利要求1或2所述的變異葡萄糖脫氫酶，其中，相應(yīng)于326位、365位及472位的位置以外具有序列號(hào)8所示的氨基酸序列。

6.如權(quán)利要求1或2所述的變異葡萄糖脫氫酶，其中，相應(yīng)于326位、365位及472位的位置以外具有序列號(hào)9所示的氨基酸序列。

7.如權(quán)利要求1或2所述的變異葡萄糖脫氫酶，其中，相應(yīng)于326位、365位及472位的位置以外具有序列號(hào)10所示的氨基酸序列。

8.如權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶，其特征在于，與所述氨基酸序列中相應(yīng)于326位及365位的氨基酸殘基分別被谷氨酰胺及酪氨酸取代但472位未被取代的葡萄糖脫氫酶相比較，對(duì)葡萄糖的底物特異性提高，對(duì)二糖類的反應(yīng)性降低。

9.如權(quán)利要求1～8中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶，其特征在于，二糖類為麥芽糖。

10.變異葡萄糖脫氫酶復(fù)合體，其至少包含權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶和電子傳遞亞單位。

11.如權(quán)利要求10所述的葡萄糖脫氫酶復(fù)合體，其特征在于，電子傳遞亞單位為細(xì)胞色素C。

12.編碼權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶的DNA。

13.微生物，其保持權(quán)利要求12所述的DNA，產(chǎn)生權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶或者權(quán)利要求10或11所述的變異葡萄糖脫氫酶復(fù)合體。

14.葡萄糖檢測(cè)試劑盒，其包含權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶、權(quán)利要求10或11所述的變異葡萄糖脫氫酶復(fù)合體、或者權(quán)利要求13所述的微生物。

15.葡萄糖傳感器，其包含權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的變異葡萄糖脫氫酶、權(quán)利要求10或11所述的變異葡萄糖脫氫酶復(fù)合體、或者權(quán)利要求13所述的微生物。