[發(fā)明專利]銀杏活性成分萃取分離方法及萃取的活性物質在治療心腦血管疾病藥物中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110404145.4
• 申請日: 2011-12-01
• 公開（公告）號: CN102416027A
• 公開（公告）日: 2012-04-18
• 發(fā)明（設計）人: 孫紅;李保民;劉勇林;布會敏
• 申請（專利權）人: 徐州醫(yī)學院
• 主分類號: A61K36/16
• 分類號: A61K36/16;A61P9/00;A61K127/00
• 代理公司: 徐州市三聯專利事務所 32220
• 代理人: 周愛芳

1.一種銀杏活性成分的萃取分離方法，以干銀杏葉為原料制取，包括以下工藝步驟：

1)銀杏葉活性成分黃酮類和萜內酯類化合物的提取：銀杏干葉磨粉，用70％乙醇以7倍量微沸提取兩次，每次提取2小時，減壓回收乙醇，水沉，過DA101大孔樹脂柱，水洗，40％乙醇溶液以1BV/h的速度洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，干燥粉碎即得銀杏葉提取物；

2)去除銀杏酚酸：采用溶劑法除酸，所述溶劑法除酸是：濃縮步驟1)所得洗脫液，調節(jié)pH值為5，以石油醚為萃取劑萃取5次，取水相，加一半水相體積的95％乙醇減壓蒸餾，即得低酸銀杏葉提取物；

3)銀杏黃酮與內酯粗分離：采用溶劑法分離；所述溶劑法分離黃酮與內酯是：取銀杏葉提取物，用乙醇溶液充分溶解，緩慢加入有機溶劑正丁醇，過濾，取濾液，用3％氨水溶液洗滌，濃縮回收有機相，酸化，減壓干燥得內酯；減壓蒸發(fā)弱堿洗滌液，鹽酸酸化，結晶，減壓干燥結晶，干燥結晶，得黃酮；

4)純化內酯，即銀杏內酯的族分離：利用高效液相色譜法純化內酯：流動相選擇體積比為55∶40∶5的乙酸乙酯、石油醚和甲醇的混合溶劑，流速為26ml/min，上樣量為120mg。

2.根據權利要求1所述的銀杏活性成分的萃取分離方法，其特征在于步驟2)去除銀杏酚酸還可以采用樹脂法除酸，具體為：銀杏葉提取物粉末50％乙醇溶解(乙醇的用量以剛好使得銀杏葉提取物全溶)，鹽酸調節(jié)pH為5，過AB-8柱70％乙醇洗脫，水沉10h取清液，濃縮干燥粉碎，得低酸銀杏葉提取物。

3.根據權利要求1所述的銀杏活性成分的萃取分離方法，其特征在于步驟3)銀杏黃酮與內酯粗分離還可以采用樹脂法分離，具體方法是：將銀杏葉提取物用20％乙醇溶解，調節(jié)pH值為4.5，過聚酰胺樹脂柱，先以蒸餾水洗柱20分鐘，速率1BV/h，分別以10％和60％的乙醇溶液梯度洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，蒸發(fā)干燥，分別得黃酮與內酯。

4.本發(fā)明所提取的高純度銀杏內酯在治療心腦血管疾病藥物中的應用。