[發明專利]hSCARB2基因轉殖鼠的制造及其做為腸病毒感染動物模式的應用

有效

• 申請號: 201110397498.6
• 申請日: 2011-12-02
• 公開（公告）號: CN103081868A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 周彥宏;莊再成;林怡玟
• 申請（專利權）人: 財團法人衛生研究院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61D19/04;C12Q1/68
• 代理公司: 北京中博世達專利商標代理有限公司 11274
• 代理人: 申健;王俊民

1.一種制造hSCARB2基因轉殖鼠的方法，其特征在于，包含下列步驟：

a.將經由微注射入受Elongation?factor-1啟動子(EF-1αpromoter)驅動的人類SCARB2蛋白(hSCARB2)基因(SEQ?ID?NO.1)的小鼠胚胎，轉殖到同品系母鼠中使其發育成鼠；

b.利用PCR分析篩檢出帶有hSCARB2蛋白基因型的陽性小鼠，與原生型同品系小鼠互相交配，生成F0小鼠；

c.再次以PCR分析篩選出其基因型為異核型(heterozygous)的陽性F0小鼠，并使呈陽性F0小鼠互相交配生成F1小鼠；

d.利用PCR分析篩選得其基因型為同核型(homozygous)的陽性F1小鼠，而得hSCARB2基因轉殖鼠；及

e.利用RT-PCR分析確認F1基因轉殖鼠在主要器官表達hSCARB2蛋白。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該基因轉殖鼠于自然界流行的腸病毒株感染后，會呈現手足口病(HFMD)的癥狀和神經系統的病變。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該用于基因轉殖的小鼠是C57BL/6小鼠。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該用于基因轉殖的小鼠是FVB小鼠。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該制得的hSCARB2基因轉殖鼠用做為手足口病的動物模式。

6.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，該制得的hSCARB2基因轉殖鼠用做為腸病毒71型的感染動物模式。

7.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，該制得的hSCARB2基因轉殖鼠用做為克沙奇病毒16型(Coxsackie?A16)的感染動物模式。

8.一種檢測腸病毒疫苗保護效力的方法，其特征在于，利用根據權利要求1所述的方法所制得的hSCARB2基因轉殖鼠為動物模式，評估候選腸病毒疫苗在疫苗接種后施予腸病毒攻毒時，對于已受免疫的hSCARB2基因轉殖鼠所產生的抗病毒保護效力。

9.一種用于篩檢出有效治療腸病毒所引起的手足口病的治療性疫苗或藥物的方法，其特征在于，包含：

(1)將根據權利要求1所述的方法所制得的hSCARB2基因轉殖鼠以自然界流行的腸病毒株感染，使其呈現手足口病(HFMD)的癥狀；

(2)將呈現病癥的hSCARB2基因轉殖鼠施予候選疫苗或藥物；

(3)于一段治療時間后，與未施予候選疫苗或藥物的動物進行比較，以評估該候選疫苗或藥物在療腸病毒所引起的手足口病的功效。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，用于篩選出用于治療腸病毒71型感染的藥物。

11.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，用于篩選出用于治療克沙奇病毒16型感染的藥物。