[發明專利]一種中藥提取物中聚酰胺殘留物的檢測方法

有效

• 申請號: 201110391851.X
• 申請日: 2011-12-01
• 公開（公告）號: CN103134884A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 葉正良;劉君動;李德坤;周大錚
• 申請（專利權）人: 天津天士力之驕藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 王為

技術領域：

本發明涉及一種中藥提取物中的雜質檢測方法，特別涉及一種中藥提取物中聚酰胺殘留物的檢測方法。?

背景技術：

聚酰胺樹脂是由ε-己內酰胺聚合而成的一類高分子化合物，由于ε-己內酰胺的開環聚合是一個復雜的可逆過程，反應平衡后的產物含有一定量的己內酰胺和環狀低聚物，大約有2％己內酰胺和己內酰胺環狀低聚體存在于聚酰胺樹脂中成品中。為了保證安全，使用前進行精制。但生產過程中如果聚酰胺樹脂脫落二聚體、三聚體等低聚物，則最后會殘留在提取物中。由于己內酰胺環狀低聚體也能引起不良反應，所以需對它們進行殘留控制。?

中藥的一些成分需要經過聚酰胺樹脂進行分離純化，如果在分離純化過程中最終產物含有聚酰胺殘片或己內酰胺環狀低聚體，則會導致不良后果，為檢測中藥提取物中聚酰胺殘留物，本發明提供了一種便捷快速，靈敏度高的聚酰胺殘留物的檢測方法。?

丹參為唇形科植物丹參(Salvia?miltiorrhiza?Bge)的干燥根及根莖，性苦、微寒，歸心、肝經，具有祛瘀止痛、活血通經、清心除煩之功效，是常用的活血化淤中藥^[1]。注射用丹參多酚酸的主要組分是丹參多酚酸，工藝過程中使用了聚酰胺樹脂進行分離純化。例如，專利公開號CN101434590A公開了一種丹參粗粉3kg，加鹽酸水溶液15倍量，浸漬15次，每次6小時，過濾，濾液上聚酰胺柱(60-100目，1kg)柱，上完各次酸水浸漬液后，用18-19％乙醇水溶液洗聚酰胺柱除雜質，然后用水洗色譜柱，將醇洗凈后，用0.01％碳酸氫鈉水溶液洗色譜柱，收集洗脫液，用鹽酸調洗脫液使pH值小于2，上大孔吸附樹脂(AB-8，2kg)柱，上完大孔樹脂柱后，用16％乙醇水溶液洗樹脂柱除雜質，再用95％乙醇洗樹脂柱，收集95％乙醇洗脫液，回收至干，得干粉A，取干粉A，加丙醇10倍量溶解，過濾，回收濾液至干，得干粉B，取干粉B，加乙酸乙酯10倍量溶解，過濾，回收濾液至干，得干粉C，取干粉C，加60％乙醇水溶液適量溶解，上sephadexLH-20?柱，用60％乙醇水溶液洗色譜柱，根據TCL合并洗脫液，回收至干，得干粉丹酚酸B.專利公開號CN101721468A公開了丹參飲片1000g，7000ml80％乙醇回流提取四次，每次1小時，合并提取液，濃縮至無醇味，濃縮液用10％鹽酸調PH值到3.2，離心，上清液通過400g聚酰胺，10000ml水沖洗，0.1％碳酸氫鈉10000ml，洗脫，洗脫液10％鹽酸調pH值到3.2，通過1000Gab-大孔樹脂5000ml水沖洗，10000ml?160％乙醇溶液，濃縮乙醇洗脫液，噴霧干燥，得提取物52g，丹酚酸B含量65％，丹參總酚酸86％。?

本發明以丹參多酚酸為例，選擇一種高效液相色譜法檢測其中聚酰胺殘留物的方法。?

發明內容：

本發明涉及的是一種中藥提取物中聚酰胺殘留物及丹酚酸中聚酰胺殘留物的檢測方法。?

發明人在研究過程中發明發現：聚酰胺樹脂通過酸水解生成己內酰胺，進一步被水解生成氨基己酸，其聚酰胺的水解過程如下?

聚酰胺水解反應式?

水解后，通過高效液相色譜法對聚酰胺樹脂水解液進行測定，發現只含有氨基己酸，不含有己內酰胺，說明水解已經完全。利用該水解條件可以對中藥提取物進行水解。?

本發明的技術方案是這樣實現的：?

本發明一種中藥提取物中聚酰胺殘留物的檢測方法，包括如下步驟：?

步驟1，供試品溶液制備；取中藥提取物，加15-25倍量酸水解4-14小時，取水解液調節pH，搖勻，即可；?

步驟2，對照品溶液制備；取氨基己酸，加水溶解，定容至容量瓶中，搖勻，即得氨基己酸對照溶液；取己內酰胺，加水溶解，定容至容量瓶中，搖勻，即得己內酰胺對照品溶液。?

步驟3，注入高效液相色譜儀，得到色譜圖；?

步驟4，根據色譜圖得到供試品溶液中聚酰胺殘留物成分的種類和含量。?

上述優選步驟1中所述的酸為強酸，包括但不限于三氟甲磺酸、磺酸、硝酸、三氟乙酸、三氯乙酸、甲磺酸、苯磺酸、草酸、甲酸、鹽酸、硫酸、磷酸等，優選鹽酸，濃度為20-60％濃硫酸，最佳為濃鹽酸或40％濃硫酸。步驟1具體方案為用18-22倍量的硫酸或濃鹽酸，酸解時間為4-12小時，pH值為5-8，最佳為20倍量濃鹽酸，回流水解，回流12h，pH至6-7。?

上述優選步驟2中氨基己酸對照溶液溶液濃度為1.5-2.0mg/ml，己內酰胺對照品溶液濃度為1.5-2.0mg/ml。?