[發(fā)明專利]一種從發(fā)酵液中提取多粘菌素B的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110385129.5 | 申請日： | 2011-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN103130875A | 公開（公告）日： | 2013-06-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張元欽;那可;趙文杰;趙波;程晴華 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院;中國醫(yī)藥工業(yè)研究總院 |
| 主分類號： | C07K7/62 | 分類號： | C07K7/62;C07K1/36;C07K1/30;A61K38/12;A61P31/04 |
| 代理公司： | 上海智信專利代理有限公司 31002 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 200040 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 發(fā)酵 提取 多粘菌素 方法 | ||
1.一種從多粘菌素B的發(fā)酵液中提取多粘菌素B的方法，包括以下步驟：
a.將多粘菌素B的發(fā)酵液固液分離，取濾液；
b.將步驟a所得的濾液用極性有機溶劑萃取，萃取液在pH1.0～2.0用水反萃；和
c.將步驟b所得的反萃液中加入反萃液體積3～8％(w/v)的無機鹽，并調(diào)整至pH?9.0～10.0，從而析出沉淀，即為多粘菌素B。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a所述的多粘菌素B的發(fā)酵液在固液分離前經(jīng)過預處理，包括調(diào)節(jié)發(fā)酵液pH至2.0～3.0，80～100℃加熱25～60分鐘。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b所述的極性有機溶劑選自C4～C8的烷基醇，或者是烷基醇與烷基酸所形成的C4～C8的酯。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟b所述的極性有機溶劑選自正丁醇、正戊醇、乙酸乙酯和乙酸丁酯。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c所述無機鹽為銨鹽或者鈉鹽。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括步驟d：將步驟c所得的多粘菌素B和硫酸反應成鹽，然后溶析，即得多粘菌素B硫酸鹽。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟d溶析時加入有機溶劑，即得到沉淀。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
a.發(fā)酵液預處理：調(diào)節(jié)發(fā)酵液pH至2.0～3.0，80～100℃加熱25～60分鐘，得到發(fā)酵預處理液，通過固液分離得到澄清的濾液；
b.萃取：
向?qū)⒉襟Ea所得的濾液中加入濾液體積40～60％(體積百分比)的極性有機溶劑萃取劑，充分混勻后，用堿調(diào)節(jié)pH至11.0～12.5，取萃取液，用水充分洗滌，然后加入萃取液體積90～110％(體積百分比)的水，用酸調(diào)節(jié)pH至1.0～2.0，取水相，即反萃得到含有多粘菌素B的水溶液；和
c.沉淀：
將步驟b所得萃取后的多粘菌素B溶液中加入反萃液體積3～8％(w/v)的無機鹽，再調(diào)節(jié)pH至9.0～10.0，得到多粘菌素B的沉淀。
9.由權(quán)利要求1-8任一項所述的方法制備的多粘菌素B或其硫酸鹽。
10.如權(quán)利要求9所述的多粘菌素B或其硫酸鹽在制備抗生素藥物中的應用。
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