[發明專利]一種人染色體P16基因檢測試劑盒及應用

無效

• 申請號: 201110382722.4
• 申請日: 2009-05-12
• 公開（公告）號: CN102517382A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 李明;何瑰;陳娟
• 申請（專利權）人: 中山大學達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種P16基因探針檢測試劑盒，包括：1)雜交液、DAPI復染劑，和2)分隔并集中包裝這些試劑瓶或管的包裝盒，其中雜交液由雜交緩沖液、熒光標記的P16基因探針和H₂O配制而成。

2.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于每人份雜交液中使用P16基因探針的量為1.5ul～3ul，雜交緩沖液為7ul，交緩沖液中去離子甲酰胺濃度為50％～70％。

3.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征還在于所述檢測劑包括以下探針：

(1)GSP?P16探針組

包括第一探針、第二探針、第三探針和第四探針，其中，第一探針核酸序列為P16基因

(CDKN2A)5’末端以外的168kb～186kb的核酸序列；第二探針和第三探針核酸序列合起來包含P16基因及周邊200kb的核酸序列；第四探針核酸序列為P16基因(CDKN2A)3’末端以外的149kb～152kb的核酸序列；所述4個探針均位于9p21區段；

(2)CSP?9探針

包括人9號染色體9p11-q11區域的重復片段，該探針制備可以利用PCR方法擴增該重復區域制備包含重復序列的片段；

所述兩個探針選擇不同的熒光標記。

4.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征還在于所述GSP?P16探針以包含P16基因及周邊核酸序列的克隆插入片段作為探針制備模板，采用隨機引物或切口平移法進行熒光標記。

5.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征還在于GSP?P16探針可以選自如下兩個克隆組合中的任何一組或某組中的任何一個包含P16基因的克隆：

(1)RP11-70L8、RP11-149I2、RP11-478M20、RP11-248B1；

(2)RP11-1095L22、CTD-2379A22、RP11-478M20、RP11-134B17。

6.根據權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征還在于CSP?9探針可以選用如下兩個引物對中的任何一組進行擴增：

(1)上游引物：5’-ACTGATGCCACTTTTCACCCTTA-3’和下游引物5’-GGGGAGATGTTTTCTCTCAGGAT-3’，擴增產物長度為287bps；

(2)上游引物：5’-GAAATAAGGGCACCTACCCCATA和下游引物5’-CTACACCTTGGCTCCTTTTAGCA-3’，擴增產物長度為336bps。

7.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于所述試劑盒在檢測實體腫瘤(宮頸癌、膀胱癌、食管癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌、腎癌、卵巢癌等)和血液病(淋巴瘤、白血病等)中的用途。

8.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于所檢測樣本為組織樣本或細胞樣本。?