[發(fā)明專利]鹽酸托烷司瓊原料及制劑中雜質(zhì)3-吲哚甲酸的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110381957.1
• 申請日: 2011-11-26
• 公開（公告）號: CN102507796A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李潔;于黎鑫;劉緒貴;于海云;牛海崗;高希波
• 申請（專利權(quán)）人: 山東齊都藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 青島發(fā)思特專利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及3-吲哚甲酸的檢測方法，具體涉及一種鹽酸托烷司瓊原料及制劑中雜質(zhì)3-吲哚甲酸的檢測方法。

背景技術(shù)

鹽酸托烷司瓊是高度選擇性5-HT受體拮抗劑，適用于預(yù)防和治療癌癥化療、放療和手術(shù)后引起的惡心和嘔吐，其結(jié)構(gòu)式為

化學(xué)名為內(nèi)-1H-吲哚-3-羧酸-8-甲基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基酯鹽酸鹽。在合成該化合物過程中，3-吲哚甲酸作為起始底物，通過化學(xué)反應(yīng)合成鹽酸托烷司瓊，因此可能會由于反應(yīng)不完全而影響藥物的純度和質(zhì)量，需對其進行檢查。3-吲哚甲酸的結(jié)構(gòu)式為：

對于合成鹽酸托烷司瓊過程中引入的3-吲哚甲酸，原料與制劑都需要進行質(zhì)量控制。因此，實現(xiàn)鹽酸托烷司瓊及3-吲哚甲酸的分離在合成與制劑過程的質(zhì)量控制方面具有重要的現(xiàn)實意義。

在已有技術(shù)中，歐洲藥典(07版)收載的有關(guān)鹽酸托烷司瓊原料的檢測方法，在“有關(guān)物質(zhì)”的控制中，在HPLC法下采用同一色譜條件，雜質(zhì)對照品法和主成分自身對照法同時控制“3-吲哚甲酸”和未知的降解產(chǎn)物。但是，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)，該方法在對“3-吲哚甲酸”的檢查上，存在著專屬性不足的問題。因“3-吲哚甲酸”的強極性，在該色譜條件下出峰較早，導(dǎo)致溶劑峰與3-吲哚甲酸峰重合，且該色譜條件用于鹽酸托烷司瓊注射液中“3-吲哚甲酸”檢查時，問題更為突出，溶劑峰、輔料峰、3-吲哚甲酸峰均有部分重合。因此，該色譜條件不能夠?qū)Α?-吲哚甲酸”準(zhǔn)確定量。對于鹽酸托烷司瓊制劑中3-吲哚甲酸的檢測方法，僅檢測，國內(nèi)外還未見文獻報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的問題是：提供一種準(zhǔn)確地檢測鹽酸托烷司瓊原料及制劑中3-吲哚甲酸含量的方法，從而保證鹽酸托烷司瓊的藥品質(zhì)量。

所述的鹽酸托烷司瓊原料及制劑中雜質(zhì)3-吲哚甲酸的檢測方法，包括如下步驟：

(1)取鹽酸托烷司瓊原料或制劑，用初始流動相溶解并稀釋定容，配制每1ml中含鹽酸托烷司瓊0.5mg的溶液，以托烷司瓊計，作為供試品溶液；

(2)取3-吲哚甲酸對照品，加初始流動相溶解并稀釋定容，配制每1ml中含0.5μg的溶液，作為對照品溶液；

(3)取步驟(1)中制備的供試品溶液與步驟(2)中制備的對照品溶液各50μl分別注入高效液相色譜儀，進行梯度洗脫；

其中：

色譜柱：C18；

柱溫：20～45℃；

流動相流速：0.9～1.1ml/min；

檢測波長：280nm；

進樣體積：50μl；

流動相：流動相A與流動相B的混合物，流動相A是0.02mol/L的乙酸銨溶液，流動相B是甲醇，初始流動相中，流動相A與流動相B的體積百分比為92∶8～82∶18；

梯度洗脫：0～30min流動相B的體積百分比由0min時的8～18％均勻增加至30min時的45％；30～40min流動相B的體積百分比維持45％；40～50min流動相B的體積百分比由40min時的45％均勻降低為50min時的8～18％；50～55min流動相B的體積百分比維持50min時的體積百分比。

所述的柱溫優(yōu)選25～35℃。

所述的流動相流速優(yōu)選1.0ml/min。

所述的色譜柱的尺寸只影響出峰的時間，所以對色譜柱的尺寸要求不嚴(yán)格，尺寸優(yōu)選250mm×4.6mm。

所述的初始流動相中，流動相A與流動相B的體積百分比優(yōu)選92∶8。

所述的高效液相色譜儀優(yōu)選：日本島津LC-20AT，SPD-20A或美國安捷倫1200型，DAD檢測器；其他品牌及型號的高效液相色譜儀也可以。

本發(fā)明涉及的鹽酸托烷司瓊原料及制劑的雜質(zhì)中3-吲哚甲酸的檢測方法，是采用高效液相色譜法分析鹽酸托烷司瓊的純度及分離3-吲哚甲酸，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以0.02mol/L的乙酸銨溶液為流動相A，以甲醇為流動相B，進行梯度洗脫。根據(jù)對照品溶液和供試品溶液中的出峰時間確定3-吲哚甲酸存在，根據(jù)3-吲哚甲酸的出峰面積，確定供試品溶液中3-吲哚甲酸的含量。

本發(fā)明的有益效果如下：

本發(fā)明涉及的托烷司瓊原料及制劑雜質(zhì)3-吲哚甲酸的檢測方法具有專屬性強、定量準(zhǔn)確、靈敏度高、方法穩(wěn)定的特點，具體如下：

(1)專屬性強：在現(xiàn)有技術(shù)中，對鹽酸托烷司瓊原料及制劑中雜質(zhì)的檢測是綜合在“相關(guān)物質(zhì)”中檢測的，其方法是針對多種雜質(zhì)的檢測，而本發(fā)明是針對3-吲哚甲酸單種物質(zhì)的檢測，排除了檢測過程中其它雜質(zhì)的干擾；