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[發明專利]女性雌激素敏感性毒副作用易感基因無創檢測試劑盒無效

專利信息
申請號: 201110379138.3 申請日: 2011-11-23
公開(公告)號: CN102433380A 公開(公告)日: 2012-05-02
發明(設計)人: 潘加奎;姜麗 申請(專利權)人: 解碼(上海)生物醫藥科技有限公司
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 201203 上海市浦東新區*** 國省代碼: 上海;31
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摘要:
搜索關鍵詞: 女性 雌激素 敏感性 副作用 基因 檢測 試劑盒
【權利要求書】:

1.一種檢測女性雌激素敏感性毒副作用的易感基因無創檢測試劑盒,其特征在于:檢測ER-α基因Pvu?II(rs2234693)、XbaI(rs9340799),CYP17基因上MspA1I(rs743572)的3個單核苷酸多態性位點基因型的特異性引物與DNA測序引物、Taq酶、dNTP混合液、反應緩沖液、SAP酶、ExoI酶、BigDye?mix、EDTA溶液、70%乙醇溶液、100%乙醇溶液、HIDI溶液、ddH2O等。

2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述的特異性引物對是指針對ER-α基因Pvu?II(rs2234693)、XbaI(rs9340799),CYP17基因上MspA1I(rs743572)的3個單核苷酸多態性位點,能特異性擴增出包含這3個SNPs位點的DNA片段的引物對。

3.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述的DNA測序引物是針對ER-α基因Pvu?II(rs2234693)、XbaI(rs9340799),CYP17基因上MspA1I(rs743572)的3個單核苷酸多態性位點而設計,能通過DNA測序技術特異性檢測出上述3個SNPs位點基因型的DNA測序引物。

4.根據權利要求1所示的試劑盒,其特征在于,所含的2對特異性引物序列如下:

(1)ER-α(Pvu?II)/ER-α(XbaI)正向引物:5′TCTCCCACCTCAGCCTTACA3′

ER-α(Pvu?II)/ER-α(XbaI)反向引物:

5′TCCATAGCCATACTTCCCTTG3′

(2)CYP17(MspA1I)正向引物:5′CCCATACGAACCGAATAGA?3′

CYP?17(MspA1I)反向引物:5′AGTCAAGGTGAAGATCAGGGTAG3′

5.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所含的2條DNA測序引物序列如下:

(1)ER-α(PvuII)/ER-α(XbaI)測序引物:5′CCCATACGAACCGAATAGA3′

(2)CYP17(MspA1I)測序引物:5′AGTCAAGGTGAAGATCAGGGTAG3′

6.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于試劑盒的組分和含量包括:

(1)PCR反應體系:10×PCR反應緩沖液2.5ul,25mM?dNTP混合液0.2ul,5U/ul?Taq?DNA聚合酶0.125ul,20uM特異性引物對,每條引物各0.25ul,ddH2O?19.175ul。

(2)PCR產物純化體系:1U/ul?SAP酶0.75ul,10U/ul?ExoI酶0.375ul,ddH2O?3.875ul。

(3)測序反應體系:25%BigDye?mix1ul,3.2uM?DNA測序引物1ul,125mMEDTA溶液1ul,100%乙醇溶液15ul,70%乙醇溶液30ul,HIDI溶液8ul,ddH2O2ul。

本試劑盒供一人份檢測應用,試劑盒的保存溫度為-20℃。

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