[發明專利]人胸腺素β4二串體蛋白的制備方法有效
| 申請號： | 201110376361.2 | 申請日： | 2011-11-24 |
| 公開（公告）號： | CN102533911A | 公開（公告）日： | 2012-07-04 |
| 發明（設計）人： | 張英起;徐天嬌;李萌;張偉;王增祿 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第四軍醫大學 |
| 主分類號： | C12P21/02 | 分類號： | C12P21/02;C07K1/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348 | 代理人： | 蔣常雪 |
| 地址： | 710032 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 胸腺 二串體 蛋白 制備 方法 | ||
1.一種重組人胸腺素β4二串體蛋白質的制備方法，其特征在于，該制備方法包含以下步驟：
1)誘導培養含有重組人胸腺素β4二串體蛋白質的菌，離心獲得菌體；
2)加入裂菌緩沖液對菌體進行裂菌，破碎細胞，離心，收集上清液；
3)將步驟2)得到的上清液溶解在硫酸銨緩沖液中，再離心；
4)上清液上樣于一個疏水層析柱，收集各峰液進行鑒定，確定目的蛋白質所在峰；
最終獲得純度達98％以上的目的蛋白質。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中，誘導所使用的誘導劑為0.01mM的IPTG。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中，所述菌為大腸桿菌BL21。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中，菌體和裂菌緩沖液的比例為1g菌體加10ml裂菌緩沖液，所述裂菌緩沖液為STE裂菌緩沖液，該裂菌緩沖液由100mM?NaCl、1mM?EDTA、pH?8.0的20mM?Tris-HCl組成。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述硫酸銨緩沖液為含飽和度為50％硫酸銨的20mM?Tris-HCl緩沖液。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟4)中，所述層析柱為Phenyl?Sepharose?6?Fast?Flow?low?sub層析柱。
7.權利要求1-6任意一項制備方法所制備獲得的重組人胸腺素β4二串體蛋白質在促進細胞增殖中的應用。
8.權利要求1-6任意一項制備方法所制備獲得的重組人胸腺素β4二串體蛋白質在促進細胞遷移中的應用。
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