[發明專利]一種甘露聚糖酶重組表達載體和一種可自身分泌甘露聚糖酶轉基因豬的培育方法無效
| 申請號： | 201110374866.5 | 申請日： | 2011-11-23 |
| 公開（公告）號： | CN103122358A | 公開（公告）日： | 2013-05-29 |
| 發明（設計）人： | 李紫聰;劉德武;張茂;石俊松;周榮;吳珍芳 | 申請（專利權）人： | 吳珍芳 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/877;A61D19/04;A01K67/027 |
| 代理公司： | 廣州天河恒華智信專利代理事務所(普通合伙) 44299 | 代理人： | 區長釗 |
| 地址： | 510642 廣東省廣州市天*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 甘露 聚糖 重組 表達 載體 自身 分泌 轉基因 培育 方法 | ||
1.一種甘露聚糖酶重組表達載體，其特征在于該重組表達載體是將外源的甘露聚糖酶基因和調控元件拼接后，插入到真核表達載體中，構建得到由調控元件調控表達的甘露聚糖酶重組表達載體。
2.根據權利要求1所述一種甘露聚糖酶重組表達載體，其特征在于所述外源的甘露聚糖酶基因是指來源于微生物、酵母或昆蟲中的甘露聚糖酶基因。
3.根據權利要求2所述一種甘露聚糖酶重組表達載體，其特征在于所述外源的甘露聚糖酶基因是指黑曲霉甘露聚糖酶基因manA。
4.根據權利要求1所述一種甘露聚糖酶重組表達載體，其特征在于所述調控元件為口腔組織特異表達的調控元件、腮腺組織特異表達的調控元件，胃組織特異表達的調控元件或腸組織特異表達的調控元件。
5.根據權利要求1所述一種甘露聚糖酶重組表達載體，其特征在于所述真核表達載體為pCMVp-NEO-BAN、pEGFP、pEGFT-Actin、pcDNATM3.1/myc?His或pcDNA6/HisTM。
6.一種培育可自身分泌甘露聚糖酶豬重構胚的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：
步驟1
將權利要求1~5所述任一項的甘露聚糖酶重組表達載體轉染豬胎兒成纖維細胞并經篩選后制備成轉甘露聚糖酶基因的核供體細胞；
制備去核豬卵母細胞；
步驟2
將步驟1制備的核供體細胞注入步驟1制備的去核豬卵母細胞中形成重構胚；
將上述重構卵進行激活處理后，得到激活的重構胚。
7.一種可自身分泌甘露聚糖酶的轉基因豬的培育方法，其特征在于該培育方法是將權利要求6激活的重構胚進行體外培養后，將發育正常的重構胚通過胚胎移植操作移入代孕母豬子宮內，經過代孕母豬的懷孕，分娩后獲得可自身分泌甘露聚糖酶的轉基因豬。
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