[發明專利]一種血漿中多胺類物質的測定方法

無效

• 申請號: 201110373078.4
• 申請日: 2011-11-22
• 公開（公告）號: CN102426210A
• 公開（公告）日: 2012-04-25
• 發明（設計）人: 李清;畢開順;劉然;賈英;尹然
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 李宇彤

1.一種血漿中多胺類物質的測定方法，包括：

（1）血樣本預處理：

?a．取一定量的血漿，加入一定量內標溶液及一定量高氯酸、酸性甲醇或三氯醋酸溶液，渦旋混勻后，高速離心取上清液；

b．取血漿經a處理后的上清液，加入衍生化試劑，加入堿化試劑、溶劑等渦旋，超聲反應后加入中止反應試劑、萃取溶劑后震蕩，上層有機溶液轉移吹干，加入甲醇超聲離心后取上清液；

（2）?液相分離：

a．?采用C₁₈作固定相；

b．?流動相A：水，流動相B：甲醇

???（3）梯度洗脫并控制流速

?MS?測定：

電噴霧離子源，正離子掃描。

2.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于多胺類物質包括腐胺、1,3-丙二胺、尸胺、精胺、精脒等。

3.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）a操作中，內標溶液為物質量濃度為500ng/ml的1,6-已二胺，高氯酸的質量濃度為5%-9%，酸性甲醇的質量濃度為1%-5%，三氯醋酸質量濃度為5%-9%。

4.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）b操作中，衍生化試劑、堿化試劑的加入順序為先加入堿化試劑，后加入衍生化試劑。

5.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）b操作中，堿化試劑為物質量濃度0.5?mol/L至2?mol/L的氫氧化鈉溶液。

6.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）b操作中，衍生化試劑為苯甲酰氯溶液和乙腈的混合溶液，苯甲酰氯質量濃度為1%-5%。

7.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）b操作中，超聲反應時的溫度為30^oC。

8.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（1）b操作中，中止反應試劑為飽和氯化鈉溶液，萃取溶劑為乙醚。

9.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（2）中梯度洗脫為14分鐘內甲醇體積濃度由55?%上升到74?%，控制流速優選在0.8?ml/min-1.2?ml/min，設定柱溫為20?^oC-40^?oC，進樣體積為5?μL-15?μL。

10.根據權利要求1所述的血漿多胺類物質的測定方法，其特征在于步驟（3）中，質譜條件為毛細管電壓：4200-4500?V，霧化氣流速:?1.1-1.3?Bar，干燥氣流速:?5.0-7.0?L???min^-1，干燥氣溫度:?210-230?^oC，掃描范圍:?50-900?m/z，定量離子:?1,3-丙二胺?m/z:?303.1，腐胺?m/z:?319.1，尸胺?m/z:?333.2，1,6-已二胺(內標)m/z:?347.2，精脒?m/z:?480.2，精胺?m/z:?641.3。