[發明專利]一種疏血通制劑的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201110366052.7
• 申請日: 2011-11-17
• 公開（公告）號: CN102507792A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 李振國
• 申請（專利權）人: 牡丹江友搏藥業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術領域

本發明涉及中藥制劑的質量檢測方法，具體地說，本發明涉及一種疏血通制劑的質量檢測方法。

背景技術

疏血通是以地龍和水蛭為原料的中藥制劑，其劑型通常為注射液，用于治療急性期腦梗塞，具有抗栓、溶栓、改善血液循環的作用。授權公告號CN1192782C，公告日2005年3月16日，發明名稱“治療心腦血管疾病的注射劑的制造方法及其產品”的發明專利公開了該中藥制劑及其制備方法。

目前，疏血通注射液執行的是國家藥品標準WS3-548(Z-084)-2005(Z)。但是，該標準中對藥品成分的檢測指標要求相對寬泛與模糊，除中國藥典中規定的常規水針注射液所要求的檢測項目外，針對具體成分的檢測不夠具體，如僅對其中的總煻、總多糖、總氨基酸進行了規定，未進一步對單糖、多糖及氨基酸、小分子肽的具體成分進行研究。此外，指紋圖譜中僅明確了共有峰的歸屬(來源)，而未就具體的峰成分進行定性研究及歸類。

發明內容

本發明的目的是提供一種疏血通制劑的質量檢測方法。

為了實現本發明目的，本發明提供一種疏血通制劑的質量檢測方法，其特征在于，該方法包括含量測定及指紋圖譜鑒定，其中，含量測定包括氨基酸含量測定和糖含量測定；指紋圖譜鑒定包括氨基酸指紋圖譜鑒定、糖指紋圖譜鑒定和小分子物質指紋圖譜鑒定；

所述疏血通制劑用如下方法制得：將水蛭和地龍分別用2～4倍體積的生理鹽水浸提15～30小時，過濾，以體積百分書計，將33％～84％水蛭生理鹽水提取液與16％～67％地龍生理鹽水提取液的比例混合。

本發明的質量檢測方法，其中所述所述氨基酸含量測定包括如下步驟：

1)對照品溶液的制備

分別精密稱取10mg或15mg氨基酸標準品，用0.1N鹽酸定容至5ml，制得17種氨基酸儲備液；所述氨基酸標準品選自天門冬氨酸標準品、甘氨酸標準品、蘇氨酸標準品、丙氨酸標準品、酪氨酸標準品、胱氨酸標準品、苯丙氨酸標準品、異亮氨酸標準品、亮氨酸標準品、脯氨酸標準品、谷氨酸標準品、絲氨酸標準品、組氨酸標準品、精氨酸標準品、纈氨酸標準品、蛋氨酸標準品和賴氨酸標準品；

然后分別精密吸取0.5mL、1mL或2mL上述17種氨基酸儲備液，混合后用0.1N鹽酸定容至25mL，制得1號混合對照品溶液；

2)標準曲線的制備

精密量取2mL、3mL、4mL上述1號混合對照品溶液，分別用0.1N鹽酸定容至5mL，得2號、3號、4號混合對照品溶液；取2mL?3號混合對照品溶液，用0.1N鹽酸定容至5mL，得5號混合對照品溶液；取2mL?4號混合對照品溶液，用0.1N鹽酸定容至5mL，得6號混合對照品溶液；取1mL?3號混合對照品溶液，用0.1N鹽酸定容至10mL刻度，得7號混合對照品溶液；

分別將上述1-7號混合對照品溶液注入液相色譜儀測定峰面積，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；其中，色譜條件與系統適用性試驗為：

色譜柱：4.6×150mm，3.5μm?Zorbax?Eclipse-AAA柱；流速：2mL/min，流動相組成：A相pH7.8的40mmol/L?Na2HPO4溶液、B相乙腈∶甲醇∶水＝40～50∶40～50∶10，優選為乙腈∶甲醇∶水＝45∶45∶10，以A相與B相的體積比為0～100∶100～0進行梯度洗脫；檢測波長：338nm、262nm；柱溫為40℃；進樣量：1μL；理論板數按丙氨酸峰計算應不低于10000；

3)游離氨基酸含量測定

取1mL待測樣品，用0.1N鹽酸定容至5mL，制得未水解樣品；按照步驟2)的色譜條件測定峰面積，從標準曲線上讀出供試品溶液中氨基酸的含量，計算得出；

4)總氨基酸含量測定

精密量取0.5mL待測樣品，加入2mL含1％苯酚的6N鹽酸，沖氬氣10秒后，密封于110℃水解22h后，冷卻至室溫；然后加入1mL40％NaOH溶液，混勻，用0.1N鹽酸定容至5mL，制得水解樣品；按照步驟2)的色譜條件測定峰面積，從標準曲線上讀出供試品溶液中氨基酸的含量，計算得出。