[發明專利]一種煙草HPLC指紋圖譜數據庫的建立方法及應用

有效

• 申請號: 201110365632.4
• 申請日: 2011-11-17
• 公開（公告）號: CN102507829A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 矣躍平;袁仕信;何云燕;劉磊;尹曉東;唐徐紅;涂書新;何結望;閻鐵軍;李琳
• 申請（專利權）人: 云南省煙草煙葉公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

技術領域

本發明屬于煙草品質分級技術領域，具體涉及一種煙草HPLC指紋圖譜的分析方法及在烤煙質量分析、烤煙品牌識別和打葉配方中的用途。

技術背景

指紋圖譜系指將分析對象經適當處理后，采用一定的儀器分析手段得到的能夠標示該對象特性的共有峰的圖譜。指紋圖譜技術具有模糊指紋特征分析、宏觀推斷分析等特點，是進行復雜物質質量評價的有效手段。指紋圖譜技術已經成功地應用于中藥品質分析和判斷及農產品朔源等領域。鑒于此，近年來，一些研究者對指紋圖譜技術在煙草科研與生產上應用的理論和實踐問題進行了有益的探索。

經檢索，中國發明專利中指紋圖譜應用的發明專利申請涉及煙草和中成藥鑒定等多個方面。經檢索目前的相關專利文獻如下：

申請號為200810196806.7文獻涉及一種烤煙醇化品質判定的高效液相指紋圖譜分析方法。它是采用高效液相色譜分析方法測定不同煙葉樣品，得出煙葉指紋圖譜特征峰，然后利用中草藥指紋圖譜軟件對特征峰進行分析，建立指紋圖譜特征峰總面積與煙葉樣品感官質量的回歸關系模型；以感官質量為依變量y，指紋圖譜總面積x?為因變量，建立兩者的回歸關系模型為：Y＝72.04974+0.1388*LN(X)*LN(X)或?Y＝X/(0.011081*X+13.247)；根據所測樣品的指紋圖譜總面積X，計算出感官質量Y。本發明具有準確性高、穩定性好的特點，實際操作中可節省大量的人力物力財力，使用方便，能夠代替利用傳統的感官評吸方法對煙葉醇化質量的判定。

申請號為200810196807.1文獻涉及一種烤煙醇化品質判定的高效液相指紋圖譜主成分分析方法。它是采用高效液相色譜分析方法測定不同煙葉樣品，得出煙葉指紋圖譜特征峰，然后利用中草藥指紋圖譜軟件對特征峰進行分析，建立特征峰主成分值與煙葉樣品感官質量的回歸關系模型；以感官評吸值Y為依變量，7個主成分值A1?至A7為因變量，建立特征峰主成分值與感官評吸值的多元回歸模型：

Y＝85.64+1.34A1+1.21A2+0.27A3-0.40A4-1.17A5-0.46A6+0.48A7

根據分析所得到的主成分值A，計算出感官質量Y。具有準確性高、穩定性好的特點，實際操作中可節省大量的人力物力財力，使用方便，能夠代替利用傳統的感官評吸方法對煙葉醇化質量的判定。

申請號為01119925.3的文獻涉及中藥丹參水溶性提取物HPLC指紋圖譜建立的方法及其標準指紋圖譜。首先制備供試品溶液，取丹參藥材粉末(過30目篩)4.00g，加水50ml，精密稱重，回流提取2小時，放冷至室溫，補足失水，取2ml置25ml量瓶，甲醇定容至刻度，離心，取上清液作為供試品溶液。再配制對照品溶液，取丹參素鈉、原兒茶醛對照品適量，用流動相稀釋，制成每1ml中含丹參素鈉20μg，原兒茶醛5.0μg，作為對照品溶液。測定法是分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各20μl、10μl，分別注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算，即得。建立丹參標準指紋圖譜。將待測丹參樣品指紋圖譜與標準指紋圖譜對比，比較其異同。本發明的優點是方法簡便、穩定、精密度高、重現性好、易于掌握，能從色譜的整體特征面貌上把握丹參的品種和質量情況，可將其作為丹參質量控制及真偽鑒別的指標之一。

申請號為03147783.6文獻涉及一種使用高速逆流色譜(HSCCC)制訂中藥指紋圖譜的方法。該方法包括制備各批次中藥材的粗提物；通過TLC確定主要化合物類型；選取HSCCC使用的溶劑體系；使用高速逆流色譜儀純化中藥材的粗提物；使用紫外檢測器檢測洗脫液，繪制各組份的紫外吸收與洗脫時間的關系圖；通過HPLC和UV-Vis確定粗提物中各組份的對應性；判斷共有指紋峰；綜合中藥指紋圖譜方法學考察資料的數據即構成指紋圖譜。該法首次將HSCCC應用于中藥指紋圖譜的制訂，是對現有方法的重要補充，其精密度和重現性明顯優于TLC，又解決了HPLC難以分析/分離高粘度和易填料吸附的樣品以及儀器耗材昂貴的問題。

申請號為200410066701.1文獻涉及一種中藥指紋圖譜的制作方法，是一個用裂解-氣相色譜-質譜聯用技術來制作中藥指紋圖譜的方法，該方法包括下列三步步驟：1、中藥材的裂解；2、GC/MS分析；3、計算機處理，獲得標識混合體系的彩色二維條形碼，即是使得計算機能夠識別中藥的指紋圖譜。通過對同一藥材或不同藥材的標準譜圖進行精確的類似度比較，根據類似度的大小，人們可對中藥材進行鑒別。因而本發明制作方法可用來快速有效地鑒別中藥材，控制中藥材的質量，為提高中藥生產現代化程度提供一個重要的手段。